八种病毒性腹泻病原体检测试剂盒

本试剂盒可同步检测导致病毒性腹泻的8种核心病原体，覆盖90%以上的临床常见病例，适用于：

快速鉴别诊断：区分细菌性/病毒性腹泻，避免抗生素滥用

疫情暴发调查：食源性/水源性腹泻的病原溯源

院感防控：婴幼儿病房、养老院的聚集性腹泻监测

检测病原体清单

病原体 临床关联 高发人群

诺如病毒（NoV GⅠ/GⅡ） 食源性暴发主要病原 全年龄段

轮状病毒（RV-A） 婴幼儿重症腹泻首要病因 6月龄-2岁儿童

札如病毒（SaV） 社区获得性腹泻 儿童及老年人

星状病毒（AstV） 免疫功能低下者慢性腹泻 HIV患者/移植受者

肠道腺病毒（AdV-40/41） 全年散发腹泻 5岁以下儿童

人博卡病毒（HBoV） 腹泻伴呼吸道症状 婴幼儿

肠道病毒（EV） 夏秋季腹泻暴发 儿童

Aichi病毒（AiV） 旅行者腹泻常见病原 国际旅行者

二、技术原理与创新设计

1. 八重检测体系

采用微流控芯片技术，每个反应孔集成8组独立检测通道：

靶标 荧光通道 基因标记

NoV GⅠ FAM ORF1-ORF2连接区

NoV GⅡ HEX 衣壳蛋白VP1

RV-A CY5 VP6基因

SaV ROX RdRp基因

AstV Cy5.5 ORF1a

AdV-40/41 Texas Red 六邻体蛋白基因

HBoV+EV Quasar 670 NS1+VP1

AiV CAL Fluor 590 3CD蛋白酶区

2. 技术创新

超多重检测：单管反应实现8种病原体分型

内参系统：添加嗜热脂肪芽孢杆菌DNA监控提取与扩增

抗抑制设计：耐受粪便样本中胆汁盐/多糖等抑制剂

三、试剂盒组分与储存

1. 核心组分

冻干微球芯片：预装8组引物探针（每孔24反应）

粪便裂解缓冲液：含蛋白酶K和RNA稳定剂

阳性对照：8种病原体的RNA混合标准品

运输保存液：含RNase抑制剂的PBS

2. 储存条件

未开封：-80℃保存18个月，-20℃稳定6个月

开封后：芯片4℃保存≤1周（避光干燥）

运输：干冰（<-60℃）或专用冷链箱（2-8℃）

四、样本采集与处理

1. 标准化流程

粪便样本：取黄豆大小（≈100mg）加入1mL保存液

肛拭子：旋转擦拭直肠黏膜，浸入2mL PBS

呕吐物：离心取上清，过滤除渣

2. 关键注意事项

采样时机：腹泻发作24-48小时内病毒载量最高

防降解：液态样本需-80℃保存，避免反复冻融

灭活处理：95℃ 5分钟灭活其他病原体

五、检测操作流程

1. 全自动检测方案

核酸提取：配合全自动提取仪（通量1-96样本）

上样：5μL模板加入芯片反应孔

扩增：42℃ 30分钟（恒温扩增，无需热循环）

2. 结果判读

阳性阈值：荧光信号增长曲线S型且Ct≤35

交叉验证：双靶标病原体（如NoV GⅠ/GⅡ）需同时阳性