变形杆菌检测试剂盒 新品

检测目标

靶基因：

ureC基因（尿素酶亚基，属特异性标志）

rpoB基因（种水平鉴别，如P. mirabilis vs P. vulgaris）

覆盖病原种：

临床常见种：奇异变形杆菌（P. mirabilis）、普通变形杆菌（P. vulgaris）

耐药株检测：携带blaCTX-M或blaNDM的ESBLs菌株

方法原理

双重荧光PCR：

ureC-FAM探针（通用检测） + rpoB-HEX探针（分型），内标（Cy5）监控全程。

采用抗抑制剂聚合酶，适配尿液、伤口分泌物等高复杂样本。

适用样本

临床：中段尿（UTI患者）、伤口拭子、血液（败血症）

环境：医院污水、导管表面生物膜

二、试剂盒组分与操作

1. 核心组分

组分 功能说明

PCR预混液 含热启动Taq酶、dUTP/UNG防污染系统

探针引物混合液 ureC-FAM/rpoB-HEX探针，内标（VIC标记）

阳性对照 灭活P. mirabilis ATCC 29906株DNA

核酸提取试剂 磁珠法（含尿素酶抑制剂，防假阴性）

2. 操作流程（以尿液样本为例）

前处理：

5mL尿液离心（10,000g, 10min），沉淀重悬于裂解液。

PCR扩增（30μL体系）：

95℃ 5min → [95℃ 10s → 60℃ 30s]×40 cycles（FAM/HEX/Cy5同步采集）

三、性能与结果解读

1. 关键参数

指标 性能要求

灵敏度 102 CFU/mL（直接尿液）

特异性 不与摩根菌、普罗威登斯菌交叉

抗干扰性 耐受5%血红蛋白或10%尿素

2. 结果判读

属阳性：ureC（FAM）Ct≤35 → 变形杆菌感染。

种鉴别：

rpoB（HEX）Ct≤35 + 熔解峰78℃ → P. mirabilis

rpoB（HEX）Ct≤35 + 熔解峰82℃ → P. vulgaris

四、注意事项

采样要求

UTI患者晨尿检出率最高，采样后2小时内处理（防尿素酶降解RNA）。

耐药检测

若临床疑似ESBLs感染，需补充blaCTX-M检测模块。

生物安全

生物膜样本需超声破碎后检测（BSL-2操作）。

五、应用场景

临床诊断：

复杂性尿路感染（如导管相关感染）的快速病原确认。

院感防控：

手术器械生物膜污染监测。

兽医领域：

禽类坏死性肠炎病原筛查。