变形杆菌属检测试剂盒 新品

变形杆菌属检测试剂盒

试剂简介：

检测目标：特异性检测变形杆菌属（包括常见致病种如 奇异变形杆菌（P. mirabilis） 和 普通变形杆菌（P. vulgaris）），该菌属是尿路感染、伤口感染和医院获得性肺炎的常见病原体。

方法原理：基于荧光定量PCR，靶向变形杆菌属的保守基因（如尿素酶基因（ureC）或16S rRNA基因），通过FAM通道检测，搭配内参基因（如人类β-actin，HEX通道）监控样本质量。

适用样本：尿液（尿路感染）、伤口拭子、痰液（呼吸道感染）、食品和环境样本（如生肉、水体）。

2. 检测流程

样本处理

尿液/痰液：离心取沉淀，重悬于PBS。

伤口拭子：置于无菌生理盐水中震荡洗脱。

食品样本：需均质化后增菌培养（如SCDLP肉汤，37℃ 18-24h）。

DNA提取

推荐磁珠法或柱式法（如QIAamp DNA Mini Kit），避免多糖类抑制物干扰。

PCR扩增

反应体系：

引物探针：靶向ureC（FAM），内参（HEX）。

循环程序：95℃ 3min →（95℃ 15s → 60℃ 45s）×45循环。

结果判读

阳性：Ct≤35（FAM），且内参Ct≤30（临床样本）。

可疑：35<Ct<38，建议复测或测序确认。

3. 性能参数

指标 参数要求

灵敏度 ≤50 CFU/反应（纯培养）

特异性 不与大肠杆菌、克雷伯菌交叉

检出限 10^3 CFU/mL（尿液样本）

抗干扰性 耐受10%血液或黏液成分

4. 注意事项

假阳性风险：

环境中普遍存在变形杆菌，需结合临床判断是否为致病菌。

食品样本可能含死菌，建议结合培养法验证活性。

生物安全：操作需在BSL-2实验室进行，避免气溶胶污染。

质控要求：每批次含阴性对照（无菌水）、阳性对照（含ureC质粒）。

5. 应用场景

临床诊断：复杂性尿路感染（如导管相关感染）的病原鉴定。

食品安全：生鲜肉类加工链的卫生监测。

医院感染控制：ICU环境（如呼吸机管路）的污染筛查。

公司正在出售的产品：