人肾癌细胞 +luc;786-O-plv-luc-BSD

产品信息：

这是一份关于人肾透明细胞腺癌细胞（786-O）及其荧光素酶标记株（786-O-plv-luc-BSD）的详细说明及标准培养操作指南。

786-O 是肾癌研究中最常用的细胞系之一，而 786-O-plv-luc-BSD 是在此基础上通过慢病毒转染稳定表达了荧光素酶（Luciferase）和杀稻瘟菌素（Blasticidin）抗性基因的改造株，适用于活体成像（IVIS）和长期示踪实验。

别名：786-O, CRL-1932

种属来源：人（Homo sapiens）

组织来源：肾脏（Kidney）

疾病特征：肾透明细胞腺癌（Renal Clear Cell Adenocarcinoma）

细胞形态：上皮细胞样（多角形）

生长特性：贴壁生长

标记基因：LUC（荧光素酶，用于生物发光成像）、BSD（杀稻瘟菌素抗性，用于筛选维持）

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

背景简介  源自原发性透明细胞癌，具有微绒毛和桥粒结构，能在软琼脂中生长。

功能特性  分泌甲状旁腺激素样多肽（PTHrP），常用于研究高钙血症与骨转移机制。

抗性维持  培养基中通常需要添加 Blasticidin (杀稻瘟菌素) 以维持荧光素酶标记的稳定表达。

主要应用  1. 肾癌肿瘤机制研究（增殖、凋亡、侵袭）。

抗肿瘤药物筛选与药效评价。

活体成像与肿瘤转移示踪（利用 LUC 信号）。

推荐培养体系

基础培养基：RPMI-1640

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)

双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)

筛选压力：Blasticidin (杀稻瘟菌素)（通常添加浓度为 2-10 μg/mL，具体需根据预实验确定，用于维持质粒不丢失）

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

预热：37℃ 水浴锅预热完全培养基。

解冻：迅速将冻存管置于 37℃ 水浴中，1-2 分钟内快速摇晃融化。

转移：酒精消毒后转入超净台，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 3-5 分钟。

接种：弃上清，用完全培养基重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。

细胞传代 (Passage)

786-O 为贴壁细胞。

观察：当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代。

清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。

消化：加入适量消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA，约 1-2 mL），37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

镜下观察：显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

离心：1000 rpm 离心 4-5 分钟。

重悬与分瓶：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 到 1:3 的比例进行分瓶传代。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：待细胞生长状态良好时进行冻存。

消化：弃去培养基，加入少量胰酶消化，待细胞变圆脱落。

收集：加入含血清的培养基终止消化，混匀后转移至离心管。

离心：1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清。

重悬：加入配置好的冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。

分装：转移至冻存管中，放入程序降温盒（-80℃ 过夜），随后转入液氮罐长期保存。

关键注意事项

运输脱落：786-O 细胞在运输过程中，可能会因震荡导致少量细胞从瓶壁脱落。若收到细胞发现瓶底有漂浮细胞团，属正常现象。请将瓶内液体转移至离心管，离心收集细胞，弃上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培养基重悬后接种回培养瓶中。

贴壁特性：该细胞贴壁较为牢固，消化时间可能需要适当延长，但需避免消化过度损伤细胞。

荧光素酶稳定性：为了维持 LUC 标记的稳定性，建议在培养基中持续添加 Blasticidin。若长期不加压，荧光信号可能会随传代次数增加而减弱。

无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。

支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。

公司正在出售的产品：

Anti-human C3 补体C3抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Phospho-p63 (Ser395) 英文名称： 0酸化P63抑制基因抗体 0.1ml
Anti-phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 0酸化原活化蛋白激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Anti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴、0酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Brucella 布氏杆菌菌体蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1) ELISA Kit 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1
Rhesus antibody Rh Hemoglobin Beta 血红蛋白β抗体 规格 0.2ml	Bovine IgG/PE 荧光素PE标记IgG 0.1ml
phospho-MLC(Ser20) 英文名称： 0酸化肌球蛋白轻链抗体 0.1ml	Rhesus antibody Rh EIF2C1/Ago1 真核翻译起始因子2C1抗体 规格 0.2ml
AEG-1 peptide AEG-1抗原 0.5mg	CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit 人癌抗原Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-Tetracycline 四环素抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh NOX5 还原型辅酶Ⅱ氧化酶5/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸抗体 规格 0.2ml
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪组织分化相关蛋白抗原 0.5mg	Bcl-2 小鼠Bcl-2Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-glypican 3/GPC3 0脂酰基醇蛋白聚糖-3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	人肾癌细胞 +luc;786-O-plv-luc-BSDCD137 英文名称： 坏死因子受体超家族成员9抗体 0.1ml
Anti-Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) /FITC 荧光素标记0酸化组蛋白去乙酰化酶4、5、7抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	anti-phospho-Beta-catenin(Tyr142) 0酸化β 连环素蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。