人B淋巴白血病细胞+LUC;Nalm6-LUC-puro

产品信息：

Nalm-6-LUC-puro 是 Nalm-6 细胞的基因工程改造株，稳定表达荧光素酶（Luciferase, LUC）和嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。它保留了亲本细胞的生物学特性，同时具备了活体成像和药物筛选的能力，是血液肿瘤研究、药物疗效评估及异种移植模型构建的理想工具。

细胞基本信息

亲本来源：Nalm-6 (人前B急性淋巴细胞白血病细胞)

种属来源：人（Homo sapiens）

供体信息：19岁男性，急性淋巴细胞白血病（ALL）

标记基因：

LUC：荧光素酶，用于生物发光成像（需底物荧光素）。

Puro：嘌呤霉素抗性基因，用于筛选和维持质粒。

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

背景简介  通过慢病毒转染，将 LUC 和 Puro 基因导入 Nalm-6 细胞，筛选得到的稳定株。

荧光特性：该细胞通常不表达荧光蛋白（如 GFP），仅表达荧光素酶。因此在普通显微镜下无自发荧光，需通过生物发光成像（IVIS）检测。

抗性维持：培养基中通常需要添加 Puromycin (嘌呤霉素) 以维持荧光素酶标记的稳定表达。

主要应用：1. 白血病异种移植模型（如 NSG 小鼠）构建。

CAR-T 或药物体内杀伤活性评估（通过生物发光强度评估肿瘤负荷）。

微小残留病灶（MRD）检测研究。

推荐培养体系

基础培养基：RPMI-1640

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质胎牛血清）

双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)

筛选压力：Puromycin (嘌呤霉素)（通常添加浓度为 1-2 μg/mL，具体请参考构建说明书）

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。

解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，1-2 分钟内快速摇晃融化。

转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。

稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 5 分钟。

接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含 Puromycin）重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。

细胞传代 (Passage)

Nalm-6-LUC-puro 为悬浮细胞。

观察：当细胞密度达到 0.8-1.0 × 10 cells/mL 时进行传代。

收集：直接将培养瓶中的细胞悬液转移至离心管中。

离心：1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。

重悬与分瓶：

方法一（离心换液）：加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 到 1:3 的比例分装到新的培养瓶中（推荐，可去除代谢废物）。

方法二（半量换液）：若细胞密度极高，可直接吸取一半细胞悬液弃去或传代，补充等量新鲜完全培养基。

注意事项：该细胞在高密度时容易聚团，吹打时需用力均匀，确保细胞分散成单细胞悬液，以便准确计数。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：待细胞生长状态良好时进行冻存。

消化：弃去培养基，加入少量胰酶消化（虽然主要为悬浮，但可能有少量贴壁），待细胞完全脱落。

收集：加入含血清的培养基终止消化，混匀后转移至离心管。

离心：1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清。

重悬：加入配置好的冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。

分装：转移至冻存管中，放入程序降温盒（-80℃ 过夜），随后转入液氮罐长期保存。

关键注意事项

悬浮特性：该细胞在培养瓶中呈悬浮状态，呈圆形，单个或小团簇状生长。不要使用胰酶消化进行传代（除非细胞发生异常贴壁），正常传代只需离心收集并重悬即可。

抗性维持：为了防止 LUC 基因丢失，建议在培养基中持续添加 Puromycin。若用于动物实验接种，需确认动物体内无抗生素干扰。

无自发荧光：请注意，该细胞通常不表达 GFP/RFP 等自发荧光蛋白，仅表达荧光素酶。因此在普通荧光显微镜下无法直接看到荧光，需通过加入底物进行活体成像或裂解后进行荧光素酶活性检测。

运输脱落：由于是悬浮细胞，运输途中细胞会悬浮在培养基中。收到后请先观察是否有沉淀或漂浮，若有沉淀可离心收集，若悬浮良好可直接计数调整密度后培养。

支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。

公司正在出售的产品：

Anti-C5b-9 末端补体复合物抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Hydroxyethyk starch 英文名称： 淀粉抗体 0.2ml
Anti-SNAP-25 突触相关蛋白25抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Anti-Smad7/FITC 荧光素标记Smad 7抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-ICAM-2/CD102 细胞间粘附分子-2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	AMA(Human Anti-myocardial antibody) ELISA Kit 人抗心肌抗体
Rhesus antibody Rh FBXL16 FBXL16蛋白抗体 规格 0.2ml	Bovine IgG (亲和化) IgG 10mg
IFIT1B 英文名称： 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1B抗体 0.2ml	Rhesus antibody Rh Dog IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗犬IgM抗体 规格 0.1ml
ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgM	Anti-SAMDC/AMD1/FITC 荧光素标记S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-CCL16/HCC-4/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白16抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh Factor XII 凝血因子12抗体 规格 0.2ml
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗原 1mg	1,5-AG(Human 1,5-anhydroglucitol) ELISA Kit 人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-SSTR1 生长抑素受体1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	人B淋巴白血病细胞+LUC;Nalm6-LUC-puroC19orf71 英文名称： 19号染色体开放阅读框71抗体 0.1ml
Anti-SLC6A19 /FITC 荧光素标记依赖钙交换蛋白6IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-BRCA1/BAP1 癌易感基因1抗体(人)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。