人淋巴瘤细胞+LUC+eGFP;Raji-LUC-eGFP-puro 新品

                                                          人淋巴瘤细胞+LUC+eGFP;Raji-LUC-eGFP-puro
产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母本细胞：Raji (人Burkitt淋巴瘤细胞)

种属来源：人 (Homo sapiens)

组织来源：B淋巴细胞；源自一位11岁黑人男孩的左上颌骨Burkitt淋巴瘤。

标记基因：

LUC：荧光素酶，可用于生物发光成像（需底物荧光素）。

eGFP：绿色荧光蛋白，可在荧光显微镜下直接观察（Ex/Em = 488/507 nm）。

Puro：嘌呤霉素抗性，用于维持筛选压力，确保标记基因的稳定表达。

病毒特征：EB病毒（EBV）阳性。

生物安全等级：BSL-2（建议在二级生物安全柜内操作）。

核心参数速览

特征  描述

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S

生长状态  悬浮生长 (圆形，单个或团簇)

传代比例  1:2 ～ 1:5

倍增时间  约 24-36 小时

冻存条件  90% FBS + 10% DMSO 或专用无血清冻存液

详细培养操作指南

Raji 细胞属于淋巴瘤细胞，对机械损伤和环境变化相对敏感，且容易聚团。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度（70%-80%）

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质血清）。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

筛选抗生素：嘌呤霉素 (Puromycin)。

注意：为了维持 LUC 和 eGFP 的表达，建议在培养基中持续添加适量的嘌呤霉素（具体浓度需参考构建时的筛选浓度，通常为 1-10 μg/mL）。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 或细胞浓度过高时)

Raji 细胞是悬浮细胞，无需胰酶消化。

观察：在显微镜下观察细胞密度和活率。细胞呈圆形，单个或聚集成团。

收集：将培养瓶中的细胞悬液直接转移至离心管中。

离心：1000 rpm (约 200-300g) 离心 5 分钟。

弃上清：小心吸去上清液。

重悬：加入新鲜预热的完全培养基重悬细胞沉淀。

分装：按 1:2 至 1:5 的比例分装到新瓶中。

技巧： 如果细胞聚团严重，可轻轻吹打将其吹散，但不要过度用力以免损伤细胞膜。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。

复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。

注意事项与常见问题

运输中的脱落（常见问题）：

悬浮细胞在运输途中极易因震动而分散。收到细胞后，如果直接观察瓶底无明显细胞沉淀，请务必先颠倒混匀或离心运输培养基，切勿直接丢弃。

细胞聚团：

Raji 细胞容易形成大的细胞团块。少量聚团是正常的，但如果团块过大，可能会导致中心细胞缺氧死亡。建议传代时轻轻吹散细胞团。

荧光观察：

eGFP：在荧光显微镜的 GFP 通道下观察，细胞应呈现明亮的绿色荧光。

LUC：需加入底物（D-luciferin）后通过化学发光仪或 IVIS 成像系统检测。

培养基颜色变化：

悬浮细胞代谢较快，需密切观察培养基颜色（pH值）。若培养基迅速变黄（酸化），说明细胞密度过大或代谢废物积累，需及时换液或传代。

公司正在出售的产品：

Anti-phospho-P53 (Ser9)/FITC 荧光素标记0酸化抑制基因P53抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	PGGT1B 英文名称： 香叶烯基转移酶1β抗体 0.2ml
Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246) 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	BRCA-1(Human breast cancer susceptibility protein 1) ELISA Kit 人癌易感蛋白1Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-SLAMF9/CD2F-10 CD2F-10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓0脂抗体IgA
Rhesus antibody Rh Glypican 5 0脂酰基醇蛋白聚糖-5抗体 规格 0.2ml	BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B细胞特异性转录因子抗原 0.5mg
Gastrin Releasing Peptide 英文名称： 促胃泌素释放肽抗体 0.2ml	Rhesus antibody Rh CYP2C19 细胞色素P450 2C19抗体 规格 0.2ml
ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原	Anti-DcR2/CD264 /FITC 荧光素标记抗诱捕受体2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Rsk2/MAPKAP Kinase 1b/FITC 荧光素标记核糖体S6激酶RSK2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh GKRP 葡萄糖激酶调节蛋白抗体 规格 0.2ml
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4	Anti-SMMHC/MYH11/FITC 荧光素标记平滑肌肌球蛋白重链抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-PDEF 上皮特异性ETs转录因子抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	人淋巴瘤细胞+LUC+eGFP;Raji-LUC-eGFP-puroRhesus antibody Rh RNF130/ 环指蛋白130抗体 规格 0.2ml
MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基质金属蛋白酶-17抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg	Anti-CCL14/HCC-1 嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。