人间质大细胞淋巴瘤;FE-PD

产品信息：

1. 细胞基本特性与背景

来源背景： 取材于人间质大细胞淋巴瘤（Immunoblastic Large Cell Lymphoma）组织。

细胞类型： 肿瘤细胞（淋巴瘤细胞）。

物种来源： 人。

应用领域： 仅限于科学研究，常用于淋巴瘤的药效学评价、细胞凋亡及信号通路研究。

培养条件与完全培养基配置

FE-PD 细胞对培养基的要求较为明确，通常使用 RPMI-1640 培养基。

基础培养基： RPMI-1640。

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 10%。

双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%（通常为青霉素100 U/mL，链霉素100 μg/mL）。

培养环境：

温度： 37℃。

气相： 5% CO，95% 空气（部分细胞系可能需要更高湿度，建议保持培养箱内有水盘）。

湿度： 饱和湿度。

详细培养操作指南

细胞复苏

快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，轻轻摇晃，使其在 1 分钟内完全融化。

稀释转移： 用酒精消毒管壁，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中混匀。

离心洗涤： 1000 rpm 离心 5 分钟。

重悬接种： 弃去上清液（去除残留的DMSO），加入适量新鲜完全培养基重悬细胞，接种到 T25 培养瓶或培养皿中。

静置培养： 放入培养箱中培养，次日观察细胞状态并更换新鲜培养基。

细胞传代（当细胞密度达 80%-90% 时）

由于 FE-PD 为悬浮细胞，操作相对简单，无需胰酶消化：

收集细胞： 将培养瓶中的细胞悬液转移至离心管中。

离心： 1000 rpm 离心 5 分钟。

弃上清： 弃去旧培养基。

重悬： 加入新鲜完全培养基重悬细胞沉淀。

分瓶： 按 1:2 至 1:3 的比例进行分瓶传代（例如：1瓶 T25 分到 2-3瓶 T25），补充新鲜培养基后放入培养箱继续培养。

注意：若细胞聚团严重，可轻轻吹打混匀，或通过筛网过滤。

细胞换液（针对悬浮细胞）

频率： 通常每 2-3 天换液一次，或根据细胞密度和培养基颜色（变黄）决定。

方法：

离心： 取出培养瓶，将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 5 分钟。

去旧液： 弃去上清液（此时细胞在管底形成肉眼可见的白色小点）。

补新液： 加入预热的新鲜完全培养基重悬细胞，放回培养瓶继续培养。

细胞冻存

收集： 收集处于对数生长期的细胞，离心（1000 rpm, 5 min）。

冻存液： 弃上清，加入冻存液（推荐 90% FBS + 10% DMSO，或专用无血清冻存液）重悬细胞，使细胞密度为

程序降温： 将冻存管放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱 过夜。

长期保存： 第二天将细胞转入 液氮罐 中长期保存。

关键注意事项（必读）

悬浮生长特性：

FE-PD 细胞在显微镜下呈圆形，悬浮于培养基中，不会贴附在瓶壁上。观察时需轻轻混匀后取样，或直接在显微镜下观察瓶底沉淀的细胞。

细胞聚团：

淋巴瘤细胞容易发生细胞聚集或成团生长，这是正常现象。传代时轻轻吹打即可分散，若聚团严重可能会影响细胞计数和均匀性。

培养基颜色：

悬浮细胞代谢较快，需密切观察培养基颜色。若培养基迅速变黄（pH值下降），需立即换液或传代。

支原体检测：

作为血液来源细胞，建议定期进行支原体检测，确保实验环境无污染。

总结

FE-PD 是研究间质大细胞淋巴瘤的重要工具。培养它的核心在于定期离心换液（维持营养环境）和控制细胞密度（防止过度拥挤）。由于其悬浮特性，操作相对简单，无需消化步骤，但需注意细胞的聚集状态。

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细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。