人肾透明细胞癌细胞;89C-A1 新品

产品信息：

这是一份关于人肾透明细胞癌细胞（89C-A1）的详细说明、细胞特性及标准培养操作指南。

89C-A1 是一种来源于人肾透明细胞腺癌的细胞系，具有典型的上皮样形态和贴壁生长特性，常用于肾癌的发病机制研究、药物筛选及毒理学实验。

细胞基本信息

种属来源：人（Homo sapiens）

组织来源：肾脏（Kidney）

疾病特征：肾透明细胞腺癌（Renal Clear Cell Adenocarcinoma）

细胞形态：上皮细胞样（Epithelial-like）

生长特性：贴壁生长（Adherent growth）

生物安全等级：BSL-1 / BSL-2

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

背景简介  该细胞系来源于人肾透明细胞癌组织，是研究肾癌生物学行为的常用工具。

形态特征  细胞呈上皮样，多角形，核仁清晰，在培养皿中呈铺路石状排列。

主要应用  1. 肾癌肿瘤机制研究（如增殖、凋亡、侵袭）。

抗肿瘤药物筛选与药效评价。

肾癌特异性标志物研究。

推荐培养体系

基础培养基：DMEM（高糖）

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)

双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)（可选）

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。

解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，轻轻摇晃，使其在 1-2 分钟内 快速融化。

转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。

稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 4-5 分钟。

接种：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。

细胞传代 (Passage)

89C-A1 为贴壁细胞。

观察：当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代。

清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。

消化：加入适量消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA），以覆盖瓶底为宜。

镜下观察：置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟，在显微镜下观察，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

离心：1000 rpm 离心 4-5 分钟。

重悬与分瓶：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 到 1:5 的比例进行分瓶传代。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：待细胞生长状态良好时进行冻存。

消化：弃去培养基，加入少量胰酶消化，待细胞变圆脱落。

收集：加入含血清的培养基终止消化，混匀后转移至离心管。

离心：1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清。

重悬：加入配置好的冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。

分装：转移至冻存管中，放入程序降温盒（-80℃ 过夜），随后转入液氮罐长期保存。

关键注意事项

运输脱落：89C-A1 细胞在运输过程中，可能会因震荡导致少量细胞从瓶壁脱落。若收到细胞发现瓶底有漂浮细胞团，属正常现象。请将瓶内液体转移至离心管，离心收集细胞，弃上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培养基重悬后接种回培养瓶中。

贴壁特性：该细胞贴壁较为牢固，消化时间可能需要适当延长，但需避免消化过度损伤细胞。

无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。

支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。

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细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。