人T淋巴瘤白血病细胞;H9/Feeder frecl 新品

产品信息：

细胞背景与基本特性

别名：HT clone H9; HT(H9); H-9

种属来源：人 (Homo sapiens)

组织来源：T淋巴细胞（源自皮肤T细胞淋巴瘤）

表面标志物：表达 CD3 和 CD4。

应用领域：常用于免疫学研究、HIV-1（艾滋病病毒）的检测与增殖（因其对HIV-1敏感）、以及白血病/淋巴瘤的药物筛选。

核心参数速览

特征  描述

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS

生长状态  悬浮生长

传代比例  1:2 ～ 1:4

倍增时间  约 24 小时

冻存条件  50% 培养基 + 40% FBS + 10% DMSO

“Feeder free” 意味着该细胞系不需要小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）等饲养层细胞即可在体外长期增殖。这使得培养操作更加简便，减少了交叉污染的风险。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640（这是最常用的培养基）。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质血清）。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

其他添加物：部分实验方案会添加非必需氨基酸（NEAA）或 2-巯基乙醇以促进生长。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 或细胞浓度过高时)

观察：由于是悬浮细胞，直接在显微镜下观察细胞密度和状态。

收集：将培养瓶中的细胞悬液直接转移至离心管中（无需胰酶消化）。

离心：1000 rpm (约 200g) 离心 5 分钟。

弃上清：小心吸去上清液。

重悬：加入新鲜预热的完全培养基重悬细胞沉淀。

分装：按 1:2 至 1:4 的比例分装到新瓶中。

技巧：H9 细胞容易聚团，吹打时要轻柔地将大团块吹散，但不要过度用力以免损伤细胞膜。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或者专用的无血清冻存液。

复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。

注意事项与常见问题

细胞聚团：

H9 细胞在悬浮培养时容易形成细胞团。少量聚团是正常的，但如果团块过大，可能会导致中心细胞缺氧死亡。

对策：定期轻柔吹打细胞，保持细胞悬液的均匀性。

支原体污染：

淋巴瘤细胞系容易受支原体污染，建议定期检测。

培养基颜色变化：

悬浮细胞代谢较快，需密切观察培养基颜色（pH值）。若培养基迅速变黄（酸化），说明细胞密度过大或代谢废物积累，需及时换液或传代。

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细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。