人肝细胞;HL-7702

                                                          人肝细胞;HL-7702
产品信息：

1. 细胞基本特性与背景

来源背景： 该细胞系建系于1980年（叶秀珍等），最初被认为源自一名 16岁男性 的正常胎儿肝组织。

细胞类型： 通常被归类为正常肝细胞（实际上是一种永生化的肝细胞系）。

生长特性： 贴壁生长。

细胞形态： 上皮细胞样（多角形），电镜下可见桥粒和张力原纤维。

关键标志物：

AFP（甲胎蛋白）： 阴性。

CK-19（细胞角蛋白19）： 阴性。

ALB（白蛋白）： 表达（但多次传代后可能丢失）。

身份争议（重要）： 多项研究（如FASEB J, 2015）和数据库（如DSMZ）指出，HL-7702的STR位点与HeLa细胞（宫颈癌细胞）高度匹配，被标记为受污染的细胞系。这意味着它可能并非真正的正常肝细胞，或者在长期传代中被HeLa细胞取代/污染。

培养条件与完全培养基配置

HL-7702 细胞的培养条件相对标准，使用最广泛的培养基是RPMI-1640。

基础培养基： RPMI-1640。

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 10%（部分实验室会使用20%，但10%是标准配置）。

双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%。

培养环境：

温度： 37℃。

气相： 5% CO，95% 空气。

湿度： 70%-80%。

详细培养操作指南

细胞复苏

快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，轻轻摇晃，使其在 1 分钟内完全融化。

稀释离心： 用酒精消毒管壁，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中混匀。1000 rpm 离心 3-5 分钟。

重悬接种： 弃去上清，加入适量完全培养基重悬细胞，接种到 T25 培养瓶中。

静置培养： 次日观察细胞贴壁情况，建议更换新鲜培养基以去除残留的 DMSO。

细胞传代（当细胞密度达 80%-90% 时）

弃液洗涤： 弃去旧培养基，用不含钙镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

消化： 加入 0.25% 胰蛋白酶（Trypsin-EDTA，约 1-2 mL），放入 37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

注意：该细胞贴壁较牢，消化时需在显微镜下观察，切勿消化过度。

终止消化： 待细胞间隙变大、变圆脱落时，加入含血清的培养基终止消化。

离心分瓶： 将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 5 分钟。弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:3 的比例分装传代。

细胞冻存

收集： 按传代步骤收集处于对数生长期的细胞。

冻存液： 推荐使用 90% 完全培养基 + 10% DMSO，或者专用的无血清冻存液。

程序降温： 将冻存管放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱 过夜，第二天转入 液氮罐 长期保存。

关键注意事项（必读）

HeLa细胞污染风险（核心问题）：

如前所述，STR分析显示其与HeLa细胞一致。这意味着你观察到的实验结果可能并非来自肝细胞，而是来自宫颈癌细胞。

建议： 在发表论文或进行关键实验时，必须进行STR鉴定，并在论文中注明这一潜在的争议，或者考虑使用其他经过验证的肝细胞系（如HL-7702的原始样本或THLE系列）作为对照。

贴壁特性：

HL-7702 细胞贴壁比较牢固，传代时需要适当的胰酶消化时间。

功能漂移：

该细胞在长期传代过程中，可能会出现形态变异（如由多角形变为长梭形）以及肝特异性功能（如白蛋白分泌）的下降。

应用场景：

尽管存在争议，目前它仍常用于肝细胞损伤模型、药物肝毒性筛选以及肝炎病毒（如HBV）感染机制的初步研究。

总结

HL-7702 (L-02) 是一个在历史上被广泛使用的人“正常”肝细胞模型。但你现在必须意识到它可能存在的HeLa细胞污染问题。在培养上，它属于典型的贴壁上皮细胞，操作难度中等，但在解释实验数据时需要格外谨慎，建议结合其他肝细胞模型进行交叉验证。

公司正在出售的产品：

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Rhesus antibody Rh TDP-43 Tar DNA 结合蛋白43抗体 规格 0.1ml	Anti-LI-cadherin 肝肠钙粘连蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-PAP2c /FITC 荧光素标记0脂酸0酸酶2C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	人肝细胞;HL-7702ASB3 英文名称： 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh SCYL1BP1 SCYL结合蛋白1抗体 规格 0.1ml	CD25/IL-2RA(Imterleukm-2 Receptor alpha) CD25/白介素2-受体(抗原) 0.5mg

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。