人经典型霍奇金淋巴瘤细胞株;L428

                                                          人经典型霍奇金淋巴瘤细胞株;L428
产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

建立时间与来源：L-428 细胞系于 1979 年建立，分离自一位 33 岁女性经典型霍奇金淋巴瘤患者的胸水（胸腔积液）样本。

细胞形态：典型的 HRS 细胞样形态。在显微镜下，你通常会观察到体积较大的淋巴母细胞，常表现为双核或多核仁结构。

免疫表型特征：

CD30 (Ki-1)：阳性（强表达，是经典型霍奇金淋巴瘤的标志物）。

CD15 (Lewis X)：阳性。

CD45 (LCA)：阴性（白细胞共同抗原缺失，这也是霍奇金淋巴瘤细胞的一个典型特征）。

分子特征：

NF-κB 信号通路：组成性激活（这是 L-428 细胞生存的关键机制）。

JAK/STAT 通路：组成性激活。

EB 病毒：阴性（L-428 细胞中未检测到 EB 病毒基因组）。

生长特性：主要表现为悬浮生长，但部分细胞可能会表现出轻微的贴壁或聚团生长现象。

核心参数速览

种属来源  人 (Homo sapiens)

生物安全等级  BSL-2

倍增时间  约 24-48 小时

详细培养操作指南

L-428 细胞属于淋巴瘤细胞，对培养密度和血清质量有一定要求。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640。

血清：10% - 20% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质血清，部分实验室会提高血清比例以促进生长）。

添加剂：

非必需氨基酸 (NEAA)：1%（推荐添加）。

丙酮酸钠：1 mM（推荐添加）。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

传代操作

L-428 细胞通常呈悬浮生长，因此传代通常不需要胰酶消化，直接离心分瓶即可。

收集细胞：将培养瓶中的细胞悬液转移至离心管中。

离心：1000 rpm (约 200g) 离心 5 分钟。

弃上清：小心吸去上清液。

重悬：加入新鲜预热的完全培养基重悬细胞沉淀。

计数与分装：进行细胞计数，按 1:3 至 1:5 的比例分装到新瓶中。

注意：该细胞有密度依赖性，建议不要稀释得太厉害，保持适当的起始密度有助于细胞复苏和生长。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用程序降温盒，冻存液配方为 90% FBS + 10% DMSO。

复苏：37℃ 水浴快速解冻，直接加入含血清的培养基中混匀（无需离心去除 DMSO，除非细胞状态极差），接种后静置培养。

注意事项与常见问题

细胞聚团：

L-428 细胞容易形成细胞团块。少量聚团是正常的，但如果团块过大，可能会导致中心细胞缺氧死亡。

对策：吹打时要轻柔地将大团块吹散，但不要过度用力以免损伤细胞膜。

轻微贴壁现象：

虽然被定义为悬浮细胞，但 L-428 有时会有轻微的贴壁现象，或者在瓶底看到少量贴壁的基质细胞。

对策：传代时若发现少量贴壁细胞，可用枪头轻轻吹打下来，通常不需要胰酶消化。

支原体污染：

淋巴瘤细胞系容易受支原体污染，建议定期检测。

标志物漂移：

长期传代培养可能导致 CD30 或 CD15 的表达强度发生变化。

对策：建议定期通过流式细胞术检测表面标志物的表达情况，以确保细胞系的稳定性。

总结：L-428 是一款经典的悬浮生长霍奇金淋巴瘤细胞系。它最大的特点是CD30 和 CD15 阳性，且 NF-κB 通路异常激活。培养时请重点关注细胞的聚团情况和培养基的 pH 值（RPMI-1640 对酸碱度较敏感）。

公司正在出售的产品：

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。