人慢性粒细胞白血病细胞;KCL-22

                                                          人慢性粒细胞白血病细胞;KCL-22
产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

别名：KCL22; Kcl22; KCL22S

种属来源：人 (Homo sapiens)

组织来源：慢性粒细胞白血病 (Chronic Myelogenous Leukemia, CML) / 慢性髓样白血病

生长特性：贴壁生长 (这是 KCL-22 的一个显著特征，不同于大多数悬浮的 CML 细胞)

细胞形态：上皮细胞样 / 多边形 (贴壁后)

疾病特征：慢性粒细胞白血病

生物安全等级：BSL-1

基因表达：部分资料显示其 BCR-ABL 融合基因表达情况需具体验证，但在研究中常用于白血病机制探讨。

核心参数速览

特征  描述

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS

传代比例  1:2 ～ 1:3 (首次传代建议 1:2)

消化时间  1-3 分钟 (胰酶消化)

倍增时间  约 24-48 小时 (生长速度较快)

冻存条件  无血清冻存液 或 90% FBS + 10% DMSO

详细培养操作指南

KCL-22 细胞虽然来源于血液系统，但具有贴壁特性，因此其传代操作需要使用胰酶消化。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度 (培养箱水槽需保持湿润)

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640 (推荐添加 NaHCO 1.5g/L, D-葡萄糖 2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)

弃液：吸去旧的培养上清液。

润洗：加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液，轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次，弃去 PBS。

消化：加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液（T25 瓶加 1-2 mL），置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟。

注意：具体时间视细胞状态而定，需在显微镜下观察。

观察：待细胞间隙变大、大部分变圆并脱落时，进行下一步。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化。

离心与分装：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 3-5 分钟。弃上清，重悬后按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用无血清细胞冻存液，或者 90% 完全培养基 + 10% DMSO（现配现用）。

冻存密度：细胞密度建议为   cells/mL。

复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。

注意事项与常见问题

贴壁特性：

KCL-22 是贴壁细胞。如果你在显微镜下观察到细胞呈悬浮状态，可能是由于运输震动导致脱落，或者是消化过度/过少导致的。建议将悬浮的细胞离心收集，重悬后重新接种，并观察其贴壁情况。

消化把控：

该细胞对胰酶敏感，消化时间过长会损伤细胞。建议在显微镜下实时观察，一旦细胞变圆即刻终止消化。

运输培养基：

收到细胞后，运输用的培养基通常不再适合继续培养（可能含有抑制剂或代谢废物），请务必离心去除，并用新鲜配制的完全培养基重悬接种。

支原体检测：

建议定期检测支原体，确保实验数据的准确性。

总结：KCL-22 是一种贴壁生长的慢性粒细胞白血病细胞系。它的培养难度中等，关键在于掌握好胰酶消化的时间。如果你在实验中需要对比悬浮和贴壁的白血病模型，KCL-22 是一个很好的选择。

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CIDEC 英文名称： 细胞死亡活化蛋白抗体 0.2ml	CD200 Kit Human 人 CD200 ELISA配对抗体 ELISA

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。