荧光素酶标记的人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1-Luc

                                                          荧光素酶标记的人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1-Luc
产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母细胞来源：SK-MEL-1 细胞由 Oettgen F 及其同事建系于一名 29 岁白人男性恶性黑色素瘤患者的胸导管（淋巴系统转移灶）。

标记方式：通常通过慢病毒转导，稳定整合 Luc 基因（可能带有嘌呤霉素抗性基因 Puro）。

关键特征：

黑色素生成：该细胞系保留了产生黑色素的能力，电镜下可见色素颗粒。

致瘤性：在裸鼠体内具有高致瘤性，能形成色素性恶性黑色素瘤。

免疫反应：在 63% 的恶性黑色素瘤患者体内可检测到针对该细胞系的抗体。

荧光素酶特性：细胞稳定表达荧光素酶，加入底物 D-Luciferin 后可产生生物发光信号，可用于活体追踪肿瘤生长和转移。

核心参数速览

特征  描述

形态  球形细胞样

生长特性  悬浮生长

生物安全等级  BSL-1

倍增时间  约 100 小时（生长速度较慢）

主要应用  黑色素瘤研究、活体成像、免疫治疗研究

详细培养操作指南

SK-MEL-1-Luc 细胞的培养核心在于维持悬浮状态和防止细胞聚团死亡。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

推荐培养基配方

基础培养基：MEM-EBSS (Minimum Essential Medium Eagle)。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

针对 Luc 标记：若细胞带有 Puro 抗性，建议定期用 0.5 - 1.0 μg/mL 嘌呤霉素维持筛选，防止荧光素酶基因丢失。

传代操作 (关键步骤：易聚团)

观察密度：SK-MEL-1 生长较慢，倍增时间约 100 小时。当细胞密度达 80%-90% 或细胞悬液浓度过高时进行。

收集细胞：将培养瓶中的细胞悬液转移至离心管中（注意：不要直接倒掉上清，细胞是悬浮的）。

离心：1000 rpm (约 100-200g) 离心 3-5 分钟。

弃上清与重悬：小心弃去上清液，加入新鲜预热的完全培养基重悬细胞沉淀。

分装：按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。

技巧：若细胞团块过大，可在重悬时轻轻吹打，但不要过度用力以免损伤细胞膜。

复苏操作 (关键步骤：贴壁慢)

慢贴壁：SK-MEL-1-Luc 复苏后通常需要 24-48 小时才能完全贴壁并开始生长。

操作建议：复苏后 48 小时内不要移动培养瓶观察，也不要换液，以免干扰细胞贴壁。

注意事项与常见问题

细胞聚团问题：

悬浮细胞容易抱团。少量抱团是正常的，但过大的团块会导致内部细胞缺氧死亡。

解决方法：吹打时要轻柔地将大团块吹散。

生长缓慢：

该细胞倍增时间较长（约 100 小时），不要误以为细胞污染或死亡而频繁换液，需耐心等待其生长。

黑色素颗粒：

培养液中可能会有黑色素颗粒沉淀，这属于正常现象，不要误认为是污染。

荧光信号监测：

建议每隔几代进行一次荧光素酶活性检测，防止基因沉默导致信号丢失。

公司正在出售的产品：

Caspase9 浓缩液 0.1ml 进口分装	Anti-PAX3/FITC 荧光素标记配对盒基因3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Alpha-Synuclein 核突触蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg	抗ABC膜转运蛋白抗体 Anti-ABCG4 0.1ml
Anti-Urocortin 新型活性因子UCN抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	AQP-4(Mouse Aquaporin 4) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白4
phospho-GIT1(Tyr554) 英文名称： 0酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1 0.1ml	BDKRB1 英文名称： 缓激肽B1受体抗体 0.1ml
Anti-Mtp53/FITC 荧光素标记突变型P53抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	n-Myc 英文名称： 致癌基因n-Myc抗体 0.1ml
ACBD4 英文名称： 酰基辅酶A结合结构域蛋白4抗体 0.2ml	Anti-phospho-HDAC8(Ser39) 0酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-phospho-IRS1(Ser636/639) 0酸化胰岛素受体底物-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Rhesus antibody Rh EEF2 真核翻译延长因子2抗体 规格 0.2ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 荧光素标记0酸化血小板源性生长因子受体-B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	CD68 CD68(多肽抗原) 0.5mg
Anti-Hemagglutinin (H2N2) 病毒血凝素抗体(H2N2)Multi-class antibodies规格： 0.2ml	荧光素酶标记的人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1-LucRhesus antibody Rh DDX43/CT13 /抗原13抗体 规格 0.2ml
Anti-CHRNA4 型乙酰胆碱受体α4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	CDH16 Kit Human 人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 ELISA配对抗体 ELISA

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。