荧光素酶标记的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H157-Luc 新品

                                                          荧光素酶标记的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H157-Luc
产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母细胞来源：NCI-H157 细胞分离自一名 59 岁白人男性的肺部非小细胞肺癌组织。

标记方式：通过基因工程手段（通常是慢病毒）导入 Luciferase (Luc) 基因。

关键特征：

组织学类型：非小细胞肺腺癌（NSCLC）。

生长特性：贴壁生长。

形态：多角形（上皮细胞样）。

荧光素酶活性：细胞表达荧光素酶，可在 ATP 和氧气存在下催化底物 D-Luciferin 发光，用于活体成像（IVIS）或体外检测。

核心参数速览

特征  描述

形态  多角形 / 上皮细胞样

生长特性  贴壁生长

倍增时间  约 21-90 小时（生长速度中等）

生物安全等级  BSL-1 / BSL-2

主要应用  肺癌机制研究、活体成像、药物筛选

详细培养操作指南

NCI-H157-Luc 的培养条件与普通 NCI-H157 细胞基本一致，但建议在培养基中添加筛选抗生素以维持荧光素酶的稳定表达。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：70%-80%

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

Luc 细胞特殊添加：

嘌呤霉素 (Puromycin)：通常建议添加 1-10 μg/mL 的嘌呤霉素来维持荧光素酶基因的表达（具体浓度需参考你购买的细胞株说明书，若未加抗性筛选，可不加）。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)

弃液：吸去旧的培养上清液。

润洗：加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液，轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次，弃去 PBS。

消化：加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液（T25 瓶加 1-2 mL），置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。

观察：在显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，进行下一步。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化。

离心：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm (约 100-200g) 离心 3-5 分钟。

重悬与分装：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞，按 1:2 至 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。

注意事项与常见问题

运输中的脱落（常见问题）：

NCI-H157 细胞在运输过程中非常容易因震动而脱落。收到细胞后，如果发现瓶底有漂浮的细胞团，请不要直接丢弃。

处理方法：将培养基转移至离心管，离心（1000 rpm, 5 min）收集脱落细胞，用 PBS 重悬清洗一次，然后加入胰酶消化 20 秒左右，再用完全培养基终止并重悬，重新接种回培养瓶中。

荧光素酶信号衰减：

随着传代次数的增加，外源基因可能会发生沉默，导致荧光素酶表达减弱。

对策：定期使用嘌呤霉素进行筛选；实验前进行体外荧光素酶活性验证。

运输培养基：

收到细胞后，运输用的培养基通常不再适合继续培养（可能含有抑制剂或代谢废物），请务必离心去除，并用新鲜配制的完全培养基重悬接种。

支原体检测：

作为基因修饰细胞系，建议定期检测支原体，确保实验数据的准确性。

总结：NCI-H157-Luc 是一款贴壁生长的非小细胞肺癌工具细胞。它的培养难点在于运输后容易脱落，因此在收到细胞处理时要格外细心，尽量回收脱落的细胞。同时，为了保证活体成像实验的成功，建议维持抗生素筛选压力。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。