荧光素酶标记的人结肠癌细胞;COLO 205-Luc 新品

产品信息：

1. 细胞基本档案

特征维度  详细信息

亲本来源  人结肠癌细胞 (COLO 205)

修饰方式  慢病毒转染携带 Luc 基因

标记物  稳定表达萤火虫荧光素酶

抗性筛选  通常携带嘌呤霉素 (Puromycin) 或博来霉素 (BSD) 抗性

种属/性别  人 (男性，70岁)

组织来源  结直肠腺癌，腹水转移

特殊背景  角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性

核心特性与应用

为什么要选择COLO 205-Luc？

独特的生长模式： COLO 205细胞既有贴壁生长的群体，也有悬浮生长的群体。Luc标记后，它非常适合用于研究结直肠癌在腹膜、腹水中的播散和转移机制。

活体成像（IVIS）： 你可以通过活体成像系统，实时监测结直肠癌细胞在小鼠体内的生长情况，特别是对于腹膜转移模型的构建，它能提供极佳的发光信号。

药物筛选： 利用发光强度定量肿瘤细胞数量，快速评估化疗药物或靶向药物对结直肠癌的杀伤效果。

培养操作手册

基础培养条件

培养基： RPMI-1640 基础培养基。

血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。

添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。

传代操作 (关键难点：半贴壁)

这是培养COLO 205-Luc最关键的一步！ 很多新手会因为只收集了悬浮细胞而丢弃了贴壁细胞，导致细胞活性极差。

收集悬浮细胞： 轻轻吹打T25培养瓶，将悬浮的细胞和培养基转移到离心管中。

处理贴壁细胞：

弃去上清（已收集），用PBS轻轻润洗贴壁细胞一次（润洗液也要收集到离心管中，因为会有细胞脱落）。

加入胰酶（Trypsin-EDTA），37℃消化 1-2 分钟，直到贴壁细胞变圆脱落。

加入完全培养基终止消化，并吹打混匀。

合并： 将步骤1和步骤2的所有液体合并到一个离心管中。

离心： 1000 rpm (约200-300g) 离心 5-10 分钟。

重悬： 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬。

分瓶： 按 1:2 至 1:3 的比例传代。

冻存与复苏

冻存液： 90% 血清 + 10% DMSO，或者专用无血清冻存液。

复苏： 快速融化，离心去除冻存液，重悬接种。

注意： 复苏后细胞可能需要几天时间来恢复其半贴壁的生长状态，请耐心等待。

COLO 205-Luc 特有注意事项

抗生素维持（关键）：

为了防止荧光素酶基因在长期传代中丢失，必须定期使用嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选。

建议浓度： 通常维持浓度为 0.5 - 1.0 μg/mL（具体需根据实验室预实验确定）。如果不加压，你会发现细胞发光信号一代比一代弱。

细胞形态监控：

COLO 205细胞容易成团，传代时要吹打均匀。

它的倍增时间较长（约25-30小时），生长速度相对较慢，不要误以为是污染或死亡。

STR鉴定：

收到细胞或冻存前，务必进行 STR 鉴定，确保细胞身份正宗，且与 ATCC 数据库匹配度在 80% 以上。

总结

COLO 205-Luc = COLO 205 (半贴半悬) + Luc (活体可视化)。

它结合了亲本细胞独特的生长特性和Luc细胞的可视化优势，是研究结直肠癌腹膜转移及药效评价的强有力工具。

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Rhesus antibody Rh MMP-8 基质金属蛋白酶-8抗体 规格 0.1ml	Anti-Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 荧光素标记0酸化肝细胞生长因子受体(原癌基因)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。