荧光素酶标记的人食管鳞癌细胞;KYSE-150-Luc

产品信息：

1. 细胞基本特性与背景

来源背景： KYSE-150 细胞于 1994 年由 Y. Nakamura 建立，取材于一名 49岁日本女性 的低分化食管鳞状细胞癌组织（上段食管）。

标记方式： 稳定表达荧光素酶（Luciferase）。

生长特性： 贴壁生长。

细胞形态： 上皮细胞样。

关键基因特征：

c-erb-B (EGFR) 基因扩增（8倍）。

细胞周期蛋白 D1 (Cyclin D1) 基因扩增（4倍）。

体内成瘤性： 在裸鼠体内具有成瘤能力。

培养条件与完全培养基配置

KYSE-150-Luc 的培养基配置相对特殊，通常采用 RPMI-1640 和 F-12 的混合培养基。

基础培养基：

RPMI-1640 培养基： 48.5%

F-12 培养基 (Ham's F12)： 48.5%

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 2%（注意：血清浓度较低，部分普通细胞培养为 10%，请勿加错）。

双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%

培养环境：

温度： 37℃。

气相： 5% CO，95% 空气。

湿度： 饱和湿度。

详细培养操作指南

细胞复苏

快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，轻轻摇晃，使其在 1 分钟内完全融化。

稀释离心： 用酒精消毒管壁，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中混匀。1000 rpm 离心 3-5 分钟。

重悬接种： 弃去上清，加入适量完全培养基重悬细胞，接种到 T25 培养瓶中。

静置培养： 次日观察细胞贴壁情况，建议更换新鲜培养基。

细胞传代（当细胞密度达 80%-90% 时）

弃液洗涤： 弃去旧培养基，用不含钙镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

消化： 加入 0.25% 胰蛋白酶（Trypsin-EDTA，约 1-2 mL），放入 37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

终止消化： 显微镜下观察，待细胞大部分变圆、间隙变大时，加入含血清的培养基终止消化。

离心分瓶： 将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 5 分钟。弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:4 的比例分装到新的培养瓶中。

细胞冻存

收集： 按传代步骤收集处于对数生长期的细胞。

冻存液： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或者专用的无血清冻存液。

程序降温： 将冻存管放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱 过夜，第二天转入 液氮罐 长期保存。

关键注意事项（必读）

荧光素酶的维持：

为了维持细胞的发光强度，培养基中通常需要添加筛选抗生素（如 嘌呤霉素 Puromycin）。具体浓度需参考供应商说明书。如果不加压筛选，随着传代次数增加，发光强度可能会逐渐减弱。

特殊的培养基配方：

KYSE-150 系列细胞通常使用 RPMI-1640 与 F-12 混合的培养基，且血清浓度仅为 2%。这一点与常规肿瘤细胞（通常用 10% FBS）不同，请务必注意配置比例，以免影响细胞生长。

贴壁较弱：

KYSE-150 细胞属于贴壁相对较弱的细胞。在运输或换液过程中，可能会看到部分细胞漂浮。这通常是正常的，离心收集后重新接种即可。

应用场景：

由于其携带扩增的癌基因（如 EGFR 和 Cyclin D1），它非常适合用于食管鳞癌的靶向治疗研究以及抗肿瘤药物的体内外筛选。

公司正在出售的产品：

Anti-MT/FITC 荧光素标记金属硫蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-RACK1 受体激活蛋白激酶C1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗人IgM 规格 0.1ml	17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羟孕酮
PKB(Mouse protein kinase B) ELISA Kit 小鼠蛋白激酶BMulti-class antibodies规格： 48T	Anti-Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化雌激素受体α抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246) 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	AQP-3 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3Multi-class antibodies规格： 48T
Rhesus antibody Rh BAGE3 /抗原2.3抗体 规格 0.2ml	25(OH)D3/25 HVD3(Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3) ELISA Kit 小鼠25羟基维生素D3Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 荧光素标记腺泡0酸化Acinus抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	neurofasciu-155 神经束蛋白-155Multi-class antibodies规格： 0.5mg
Anti-GIP/FITC 荧光素标记胃泌素抑制肽抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-ADRB2/RBITC 罗丹明标记能受体β2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
ADAM9 ELISA Kit 小鼠解整合素样金属蛋白酶9	Rhesus antibody Rh SCYLV 甘蔗SCYLV抗体 规格 1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/RBITC 罗丹明标记的羊抗人IgM 规格 0.3ml	荧光素酶标记的人食管鳞癌细胞;KYSE-150-LucCD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子Multi-class antibodies规格： 48T
AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1	Anti-BRCA1/BAP1 癌易感基因1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。