荧光素酶标记的人肝癌细胞;Hep3B2.1-7-Luc

                                                          荧光素酶标记的人肝癌细胞;Hep3B2.1-7-Luc
产品信息：

1. 细胞基本档案

特征维度  详细信息

亲本来源  人肝癌细胞 (Hep3B2.1-7)

修饰方式  慢病毒转染携带 Luc 基因

标记物  稳定表达萤火虫荧光素酶

抗性筛选  嘌呤霉素 (Puromycin)

种属/性别  人 (男性，8岁黑人儿童)

组织来源  肝脏

生长特性  贴壁生长，上皮细胞样

特殊背景  HBV阳性 (含有乙肝病毒基因组)

培养操作手册

为什么要选择Hep3B2.1-7-Luc？

HBV研究模型： 这是Hep3B系列细胞最大的特点——它含有完整的乙肝病毒（HBV）基因组。如果你的研究涉及乙肝相关性肝癌、HBV复制机制或抗病毒药物筛选，它是比HepG2更合适的选择。

活体动态监测： 利用Luc标记，你可以通过活体成像系统（IVIS）实时监测肝癌细胞在小鼠体内的成瘤过程、肺转移或骨转移情况，无需处死动物，大大减少了实验误差和成本。

药物敏感性测试： 作为p53缺失的肝癌细胞系，它常用于评估靶向药物或化疗药物（如索拉非尼）对肝癌细胞的杀伤效果。

培养操作手册

基础培养条件 (争议点解析)

关于Hep3B的培养基选择，不同实验室和供应商略有差异，我为你总结了两种主流方案：

方案一（主流推荐）： MEM (Minimum Essential Medium) + 10% FBS + 1% 双抗。

补充： 部分实验室会在MEM中额外添加 1% 非必需氨基酸 (NEAA)、1% L-谷氨酰胺 和 1% 丙酮酸钠，这能更好地维持其上皮样形态。

方案二（部分供应商推荐）： DMEM (高糖) + 10% FBS + 1% 双抗。

注意： 有观点认为高糖DMEM可能导致细胞形态改变，建议优先参考你购买细胞时的说明书。若无特殊说明，MEM是更稳妥的选择。

环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。

传代操作 (关键难点：贴壁较弱)

Hep3B细胞属于上皮样贴壁细胞，但它的贴壁能力相对较弱，非常容易在清洗或移动过程中脱落。这是新手最容易出错的地方！

观察： 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代（不要等完全长满，否则容易堆积死亡）。

清洗（轻柔）： 弃去旧培养基，用预热的PBS轻轻润洗一次。动作一定要轻，防止把细胞冲下来扔掉。

消化： 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA)，放入培养箱消化 1-3 分钟。

技巧： 由于它贴壁弱，消化时间通常比HeLa等细胞短。显微镜下看到细胞间隙变大、微微变圆即可。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化。

吹打（轻柔）： 轻柔吹打混匀，避免产生过多气泡损伤细胞。

离心： 1000 rpm 离心 3-5 分钟。

重悬： 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬。

分瓶： 按 1:2 至 1:3 的比例传代。

收货处理 (如果是刚复苏或常温运输)

常温运输（T25瓶）： 收到后先不要打开，75%酒精消毒瓶壁，在培养箱中静置 1-2小时 让细胞适应环境，然后在显微镜下观察。如果密度在60%以下，直接换液培养；如果在70%以上，直接传代。

干冰运输（冻存管）： 标准快速复苏流程（37℃水浴摇动融化），离心后重悬接种。

Hep3B2.1-7-Luc 特有注意事项

抗生素维持（关键）：

为了维持Luc基因的稳定表达，防止长期培养后荧光丢失，必须定期使用嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选。

建议浓度： 平时培养维持浓度通常为 1.0 μg/mL 左右（具体视构建时的筛选浓度而定）。如果不加压，荧光信号会随着传代次数增加而逐渐减弱。

生物安全等级：

由于该细胞系含有乙肝病毒基因组（HBV DNA），虽然它不产生完整的感染性病毒颗粒，但为了安全起见，建议在BSL-2（二级生物安全）实验室条件下操作，并按有潜在生物危害性物质处理废弃物。

STR鉴定：

建议定期进行STR鉴定，确保细胞身份正宗，且与数据库匹配。

公司正在出售的产品：

Rhesus antibody Rh FRMD1 FRMD1蛋白抗体 规格 0.2ml	MRPS4 英文名称： 线粒体核糖体蛋白S4抗体 0.1ml
ARL11 英文名称： ADP核糖基化因子样11抗体 0.2ml	Rhesus antibody Rh SSX5 滑膜X断点蛋白5抗体 规格 0.2ml
Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 荧光素标记0酸化原活化蛋白激酶0酸酶-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-phospho-Smad2(Ser465) 0酸化Smad2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活酶E1抗体 规格 0.2ml	APOA1BP/AI-BP 英文名称： 载脂蛋白A1结合蛋白抗体抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELYS 转录因子ELYS蛋白抗体 规格 0.2ml	CD62L 英文名称： L选择素抗体 0.1ml
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ADAMTS12 英文名称： 整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 0.2ml	Anti-PEPT2 /FITC 荧光素标记肠道肽转运蛋白2/小肽转运蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Bax(phospho Ser184) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠等0酸化Bax抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	基质金属蛋白酶-7抗体 Anti-MMP-7 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗豚鼠IgG 规格 0.1ml	荧光素酶标记的人肝癌细胞;Hep3B2.1-7-LucAGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 晚期糖基化终末产物特异性受体(抗原) 0.5mg
Anti-CCR-2B 细胞表面趋化因子受体2B抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh TORC1/CRTC1 环腺苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体 规格 0.2ml

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。