荧光素酶标记的人胚肾细胞;HEK-293-Luc

产品信息：

这类细胞是在经典的 HEK-293 细胞系（或其衍生株如 293T）基础上，通过基因转染技术稳定表达了荧光素酶（Luciferase）。它保留了亲本细胞生长快、转染效率高的特点，同时具备了生物发光能力，广泛应用于病毒包装、药物筛选、基因表达调控及活体成像研究。

 细胞基本信息

种属来源：人（Homo sapiens）

组织来源：人胚肾细胞（Human Embryonic Kidney）

标记基因：荧光素酶（Luciferase），通常伴随嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长（部分衍生株如 293T 贴壁较弱，容易脱落）

常见亚型：市面上常见的有 293-Luc 和 293T-Luc（表达 SV40 Large T 抗原，转染效率更高）。

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

背景简介  基于 HEK-293 细胞改造而来。原始细胞是通过腺病毒 5 DNA 转染人胚肾细胞获得的。

荧光特性  稳定表达荧光素酶，加入底物 D-luciferin 后可产生生物发光，适用于活体成像（In Vivo Imaging）和体外药效评价。

筛选维持  为了维持荧光素酶基因的稳定表达，通常需要在培养基中添加嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选（通常浓度为 1-4 μg/mL，具体视细胞株而定）。

主要应用  1. 病毒包装（慢病毒、腺病毒等）。

报告基因实验。

高通量药物筛选（利用发光强度定量细胞活性）。

肿瘤生长示踪。

推荐培养体系

基础培养基：DMEM（高糖，High Glucose）

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)

双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)（可选）

筛选维持：Puromycin (嘌呤霉素)，建议浓度 1-4 μg/mL（建议每传 10 代左右用嘌呤霉素进行一次“加压筛选”，以巩固转染效果，防止荧光丢失）。

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。

解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，轻轻摇晃，使其在 1-2 分钟内 快速融化。

转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。

稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 3-5 分钟。

接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含嘌呤霉素）重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。

细胞传代 (Passage)

HEK-293-Luc 为贴壁细胞，但293T-Luc 贴壁较弱，操作需轻柔。

观察：当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代。

清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。

消化：加入适量消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），以覆盖瓶底为宜。

注意：293T 细胞贴壁较松，消化时间通常很短（37℃ 下约 1-2 分钟），镜下观察细胞变圆即可终止消化。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

离心：1000 rpm 离心 5 分钟。

重悬与分瓶：弃上清，加入新鲜完全培养基（含嘌呤霉素）重悬，按 1:3 至 1:4 的比例进行分瓶传代。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：选择对数生长期、活力好、形态佳的细胞。

计数：消化收集细胞，离心后重悬，进行细胞计数。

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用无血清冻存液。

密度：调整细胞密度至 cells/mL。

程序降温：分装入冻存管，使用程序降温盒（-80℃ 过夜），然后转入液氮罐长期保存。

关键注意事项

荧光维持（重点）：HEK-293-Luc 细胞在长期传代过程中，荧光素酶的表达可能会丢失。因此，必须在平时的培养基中添加筛选抗生素（嘌呤霉素）以维持压力。若发现荧光明显变弱，可进行短期的高浓度抗生素筛选。

贴壁特性：如果是 293T-Luc 亚型，细胞贴壁能力较弱，在运输或换液过程中容易脱落漂浮。若收到细胞发现漂浮，属正常现象，离心收集后重新接种即可。

支原体检测：HEK-293 细胞容易受到支原体污染，建议定期进行检测。

无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。

运输状态：培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞后需用 75% 酒精消毒瓶身，并在显微镜下观察细胞状态。

公司正在出售的产品：

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HBsAg(Mouse hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit 小鼠表面抗原Multi-class antibodies规格： 48T	Anti-Cdkn1c/p57/Kip2 /FITC 荧光素标记周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-EphA4/FITC 荧光素标记抗酪氨酸蛋白激酶A4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh SCHAD/HADHSC(mouse, rat) 短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体(小鼠，大鼠) 规格 0.2ml
Anti-AMPK alpha-1(phospho Ser485+Ser491) /FITC 荧光素标记0酸化腺苷单0酸活化蛋白激酶α1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Apl/APA(Human anti-phospholipid antibody) ELISA Kit 人抗0脂抗体Multi-class antibodies规格： 48T
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Anti-CD25/IL-2RA /PE-Cy5 荧光素PE-Cy5标记兔抗人、大、小鼠白介素2受体a链抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	KP(Human kaliuretic peptide) ELISA Kit 人肽Multi-class antibodies规格： 48T
SSA/RO (ribonucleoprotein complex,RNP) 核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5ml	C1D 英文名称： 核DNA结合蛋白C1D抗体 0.1ml
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化FMS样酪氨酸激酶3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	SAM68 英文名称： SRC有丝分裂相关蛋白68抗体 0.1ml
phospho-RGS19(Tyr143) 英文名称： 0酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体 0.1ml	荧光素酶标记的人胚肾细胞;HEK-293-LucAnti-CCRK/FITC 荧光素标记细胞周期相关激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
CD83 Kit Human 人 CD83 ELISA配对抗体 ELISA	BAG2 英文名称： Bcl-2结合抑凋亡蛋白2抗体 0.1ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。