荧光素酶标记的人肝星状细胞;LX-2-Luc 新品

                                                          荧光素酶标记的人肝星状细胞;LX-2-Luc
产品信息：

1. 细胞基本特性与背景

来源背景： LX-2 细胞由 Xu 等人于 2005 年建立，来源于男性肝脏组织。它是目前国际公认的人肝星状细胞（HSC）标准研究模型。

标记方式： 稳定表达荧光素酶（Luciferase），部分产品可能同时标记 GFP。

生长特性： 贴壁生长。

细胞形态： 星状或上皮样（铺路石状）。

关键标志物： 表达肝星状细胞的特异性标志物，如 α-SMA（α-平滑肌肌动蛋白）、GFAP（胶质纤维酸性蛋白）及 I 型胶原。

核心功能： 保留了原代肝星状细胞的核心功能，包括视黄醇（维生素A）代谢、对 TGF-β 等细胞因子的信号响应，以及转化为肌成纤维细胞的能力。

培养条件与完全培养基配置

LX-2-Luc 细胞的培养条件相对温和，但为了维持其表型，血清浓度和培养基选择有特定要求。

基础培养基： DMEM（低糖或高糖均可，推荐低糖 DMEM）或 RPMI-1640。

注意：部分文献和供应商推荐使用 RPMI-1640，建议优先参考随细胞说明书。

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 10%（建议使用优质胎牛血清，血清质量对 HSC 的活化状态影响很大）。

双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%。

培养环境：

温度： 37℃。

气相： 5% CO，95% 空气。

湿度： 饱和湿度。

详细培养操作指南

细胞复苏

快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，摇晃至完全融化（约 1 分钟）。

转移离心： 用酒精擦拭管壁，转移至超净台。将细胞悬液缓慢加入含 5-6 mL 预热完全培养基的离心管中混匀。1000 rpm 离心 5 分钟。

重悬接种： 弃上清，加入 5-6 mL 完全培养基重悬细胞，接种至 T25 培养瓶。

静置观察： 次日观察细胞贴壁情况，建议更换新鲜培养基以去除残留的 DMSO。

细胞传代（当细胞密度达 80%-90% 时）

LX-2 细胞贴壁较牢，且对消化时间敏感。

弃液洗涤： 弃去旧培养基，用不含钙镁离子的 PBS 润洗细胞一次（去除残留血清）。

消化： 加入 0.25% 胰蛋白酶（Trypsin-EDTA），以覆盖瓶底为宜。放入 37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。

注意：LX-2 消化时间不宜过长，否则细胞容易成团且难以吹散。

终止消化： 显微镜下观察，待细胞间隙变大、部分变圆时，立即加入含血清的培养基终止消化。

吹打分瓶： 轻轻吹打使细胞完全脱落，转移至离心管，1000 rpm 离心 5 分钟。

重悬： 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:3 的比例分装传代。

细胞冻存

收集： 按传代步骤收集对数生长期的细胞。

冻存液： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或者专用的无血清冻存液。

程序降温： 使用程序降温盒，或直接放入 -80℃ 冰箱（24小时后转入液氮）。

关键注意事项（必读）

荧光素酶的维持（重要）：

为了维持 Luc 基因的稳定表达，培养基中通常需要添加筛选抗生素（如 嘌呤霉素 Puromycin）。具体浓度需参考供应商说明书。如果不加压筛选，发光强度可能会随传代次数增加而减弱。

活化状态控制：

LX-2 细胞在体外培养时处于“部分激活”状态。如果需要研究纤维化机制，通常需要使用 TGF-β1 或 PDGF 进行诱导激活。

血清质量至关重要： 劣质血清可能含有未知的激活因子，导致细胞自发激活，影响实验结果。

贴壁特性：

该细胞在运输或消化不当的情况下，容易出现“成团”现象。如果细胞团块过大，会影响后续生长，建议传代时耐心吹打至单细胞悬液。

应用场景：

肝纤维化机制： 研究 ECM（细胞外基质）沉积、TGF-β/Smad 信号通路。

药物筛选： 评价抗纤维化药物（如姜黄素、吡非尼酮）对 HSC 增殖和活化的影响。

肝癌微环境： 与肝癌细胞（如 HepG2, SMMC-7721）共培养，研究肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）的作用。

总结

LX-2-Luc 是研究肝纤维化和肝脏疾病微环境的强有力工具。它结合了人源细胞的临床相关性与荧光标记的可视化优势。培养它的核心在于控制消化时间（避免过度消化）和使用高质量血清。只要维持好细胞的稳态，它就能为你提供稳定、可靠的发光信号，助力肝脏疾病的研究。

公司正在出售的产品：

Anti-Phospho-eNOS (Ser113)/FITC 荧光素标记0酸化合成酶3抗体(内皮型)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-C5b-9 末端补体复合物抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-GRK1/FITC 荧光素标记G蛋白偶合受体激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-OCT1 阳离子转运器1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BEND6 BEND6蛋白抗体 规格 0.2ml	Rhesus antibody Rh ZNF268 锌指脂蛋白-1c抗体 规格 0.1ml
Anti-PR (progesterone receptor) 孕激素受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	APH1a 英文名称： 早老素γ分泌酶抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗羊IgG 规格 0.1ml	CYP2E1 英文名称： 细胞色素P450ⅡE1抗体 0.1ml
Anti-IGSF8/CD316 免疫球蛋超家族成员8抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh Ghrelin/Obestatin 脑肠肽抗体 规格 0.1ml
Rhesus antibody Rh CKLFH3/CMTM3 趋化素样因子超家族成员3抗体 规格 0.2ml	EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit 人嗜酸性相关之RNA水解酵素家族成员3Multi-class antibodies规格： 48T
Rhesus antibody Rh BAT3/BAG6 Bcl2相关抗凋亡基因6抗体 规格 0.2ml	Annexin V 膜粘连蛋白-5(抗原) 0.5mg
C3 ELISA Kit 大鼠补体蛋白3	荧光素酶标记的人肝星状细胞;LX-2-LucBMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受体1A
(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基质金属蛋白酶7	Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996) 0酸化内皮生长因子受体2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。