荧光素酶标记的人结肠腺癌细胞;RKO-Luc 新品

产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母细胞来源：RKO 细胞系建系于一位 72 岁白人男性的结肠腺癌组织。

标记方式：通常通过慢病毒转导，稳定整合 Luc 基因（可能同时带有嘌呤霉素抗性基因 Puro）。

关键遗传特征：

p53 状态：含有野生型 p53 基因，且 p53 蛋白水平较高。

其他：缺乏人甲状腺受体核受体 (h-TRβ1)。

成瘤性：在裸鼠体内具有高致瘤性，能在软琼脂中形成集落。

荧光素酶特性：细胞稳定表达荧光素酶，加入底物 D-Luciferin 后可产生生物发光信号，信号强度与活细胞数量成正比。

核心参数速览

特征  描述

形态  上皮细胞样（多边形）

生长特性  贴壁生长

生物安全等级  BSL-1

倍增时间  约 21 小时

主要应用  结直肠癌机制研究、活体成像、药物筛选、转移模型

详细培养操作指南

RKO-Luc 的培养相对稳健，通常使用 MEM 培养基。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度（防止培养基蒸发）

推荐培养基配方

基础培养基：MEM (Minimum Essential Medium)。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

特殊添加（针对 Luc 标记）：

如果细胞是通过嘌呤霉素（Puro）筛选构建的，平时培养中可不加 Puro 维持，但若发现荧光信号减弱，可定期加入 0.5 - 1.0 μg/mL 嘌呤霉素进行筛选以维持基因稳定性。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)

弃液：吸去旧的培养上清液。

润洗：加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液，轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次，弃去 PBS。

消化：加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液（T25 瓶加 1 mL），置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟。

观察：在显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，进行下一步。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化。

离心：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm (约 100-200g) 离心 3-5 分钟。

重悬与分装：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞，按 1:2 至 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。

复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。

注意事项与常见问题

荧光信号衰减：

随着传代次数的增加，外源基因可能会发生沉默，导致荧光素酶表达减弱。

对策：定期使用嘌呤霉素进行筛选，或在实验前进行体外荧光素酶活性验证。

运输中的脱落：

RKO 细胞在运输过程中可能会因震动而脱落。收到细胞后，若发现瓶底有漂浮细胞，应将培养基转移至离心管离心收集，重悬后重新接种，不要直接丢弃。

培养基选择：

必须使用 MEM 培养基，部分细胞系（如 RKO）在其他培养基（如 RPMI-1640）中生长状态可能不佳。

支原体检测：

作为基因修饰细胞系，建议定期检测支原体，确保实验数据的准确性。

公司正在出售的产品：

Anti-RACK1 受体激活蛋白激酶C1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-C5b-9 末端补体复合物抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-GRK1/FITC 荧光素标记G蛋白偶合受体激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	C1q rat (ELISA Kit) 大鼠补体片断C1q
Rhesus antibody Rh RASL/RASL10A Ras样蛋白家族10A抗体 规格 0.2ml	Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗兔IgG 规格 0.1ml
AZT ELISA Kit 大鼠叠氮胸苷	Anti-ZNF474/ZFP106 锌指蛋白474抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
KP(Human kaliuretic peptide) ELISA Kit 人肽Multi-class antibodies规格： 48T	CCP(Human anti-cyclic citrullinated peptide) ELISA Kit 人抗环胍氨酸肽抗体Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-IGSF8/CD316 免疫球蛋超家族成员8抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	mouse Caspase-1 小鼠Caspase-1Multi-class antibodies规格： 48T
Neurogranin 英文名称： 神经颗粒素抗体 0.2ml	FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8 (抗原) 0.5mg
Rhesus antibody Rh MASP2 甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体 规格 0.1ml	Rhesus antibody Rh Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗体 规格 0.2ml
CXorf56 英文名称： X染色体开放阅读框56抗体 0.2ml	荧光素酶标记的人结肠腺癌细胞;RKO-LucAnti-CFTR/FITC 荧光素标记囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
ADCY1 英文名称： 腺苷酸环化酶1抗体 0.2ml	Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996) 0酸化内皮生长因子受体2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。