人间变性大细胞淋巴瘤细胞;Kapas-299 新品

产品信息：

1. 细胞基本特性与背景

来源背景： 1986年建立，取材于一名 25岁男性 T细胞非霍奇金淋巴瘤患者的外周血。

疾病类型： ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤（ALK+ ALCL）。

关键基因特征： 携带 t(2;5)(p23;q35) 染色体易位，导致产生 NPM-ALK 融合蛋白。这使得它对 ALK 抑制剂（如克唑替尼）高度敏感。

生物安全等级： BSL-2。

培养条件与完全培养基配置

Karpas-299 细胞的培养基配置相对灵活，但 RPMI-1640 是最通用的选择。

基础培养基：

首选： RPMI-1640 培养基。

替代方案： 部分实验室或特定供应商推荐使用 IMDM 培养基，认为能更好维持细胞状态。

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 10%（部分实验室为了促进生长可能会用到 20%，但 10% 是标准配置）。

双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%。

培养环境：

温度： 37℃。

气相： 5% CO，95% 空气。

湿度： 70%-80%。

详细培养操作指南

细胞复苏

水浴解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，轻轻摇晃，使其在 1-2 分钟内快速融化。

离心去毒： 用酒精消毒管壁，将细胞悬液转移至含 4-5 mL 预热完全培养基的离心管中，混匀。1000 rpm (约 100-200g) 离心 5 分钟。

重悬： 弃去上清液（去除残留的 DMSO），加入适量完全培养基重悬细胞。

接种： 将细胞接种到 T25 培养瓶或 10cm 皿中，补足培养基至 6-8 mL。轻轻混匀后放入培养箱。

细胞传代

Karpas-299 细胞生长较快，且容易聚团，建议定期传代以保持单细胞悬液状态。

观察密度： 该细胞通常在密度达到 80%-90%（或细胞浓度达到

时进行传代。

收集细胞： 由于是悬浮细胞，直接将培养瓶中的细胞悬液吸入离心管中。

离心洗涤： 1000 rpm 离心 5 分钟。弃去上清，可用 PBS 洗涤一次以去除死细胞碎片（非必须，视细胞状态而定）。

重悬分瓶： 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬。推荐传代比例为 1:2 至 1:4。

注意： 该细胞有密度依赖性，密度过低可能导致生长缓慢或死亡，因此不要传代过稀。

细胞冻存

收集： 收集对数生长期的细胞，离心去上清。

冻存液： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或者使用含血清的专用冻存液。

程序降温： 将细胞悬液分装入冻存管，放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱 过夜，第二天转入 液氮罐 长期保存。

关键注意事项（必读）

悬浮细胞操作：

离心是关键： 与贴壁细胞不同，悬浮细胞换液或传代时，必须通过离心来收集细胞，切勿直接倒掉培养基导致细胞丢失。

吹打均匀： 该细胞容易形成细胞团（聚团生长），传代时需轻轻吹打混匀，尽量分散成单细胞悬液，利于计数和生长。

生长特性：

聚团生长： Karpas-299 天生喜欢抱团，这属于正常现象。但如果团块过大，可能会影响营养吸收，建议传代时用枪头轻轻吹散。

密度依赖： 该细胞属于“群居”型，接种密度过低（例如低于

时，细胞复苏或生长会非常困难，甚至大量死亡。

药物敏感性：

作为 ALK+ 细胞系，它对 ALK 抑制剂（如 Crizotinib 克唑替尼）高度敏感，常被用作阳性对照模型来验证药物活性。

支原体检测：

淋巴瘤细胞系容易受到支原体污染，建议定期检测，以确保实验数据的准确性。

公司正在出售的产品：

Anti-Mouse IgA/FITC 荧光素标记兔抗小鼠IgA抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B) ELISA Kit 人抗DNA酶B抗体
Rhesus antibody Rh MTLC 致癌基因抗体 规格 0.2ml	4 Hydroxynonenal 英文名称： 4羟基壬烯酸抗体 0.1ml
HBeAg(Mouse hepatitis B virus e antigen) ELISA Kit 小鼠e抗原Multi-class antibodies规格： 48T	Anti-CHRNA4 型乙酰胆碱受体α4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-MIF /FITC 荧光素标记巨噬细胞移动抑制因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-XAF1 XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser272) 0酸化KLF5抗体 规格 0.1ml	Anti-Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 荧光素标记0酸化热休克蛋白27抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Phospho-NPM (Ser4) 0酸化核仁0酸蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Rhesus antibody Rh HCMV UL49 人巨细胞病毒UL49蛋白抗体 规格 0.2ml
Anti-Angiotensin II 紧张素Ⅱ抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶联血清白蛋白 1mg
PDCD7 英文名称： 凋亡相关蛋白7抗体 0.2ml	Anti-Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 荧光素标记0酸化原活化蛋白激酶MKK6抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Oct-4/FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	人间变性大细胞淋巴瘤细胞;Kapas-299BMPR- II ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ
Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B细胞因子2Multi-class antibodies规格： 48T	TRADD 英文名称： 坏死因子受体1相关死亡域蛋白抗体 0.1ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。