荧光素酶标记的人表皮癌细胞;A431-Luc 新品

                                                          荧光素酶标记的人表皮癌细胞;A431-Luc
产品信息：

1. 细胞基本档案

特征维度  详细信息

亲本来源  人表皮癌细胞 (A431)

修饰方式  慢病毒转染携带 Luc 基因

标记物  稳定表达萤火虫荧光素酶

抗性筛选  嘌呤霉素 (Puromycin)

种属/性别  人 (女性，85岁)

组织来源  皮肤表皮样癌

生长特性  贴壁生长，上皮细胞样

核心特性与应用

A431-Luc 为什么是你的首选？

EGFR 高表达模型： A431细胞最著名的特征是过度表达表皮生长因子受体（EGFR）。Luc标记后的细胞依然保留这一特性，使其成为研究EGFR信号通路、靶向药物（如西妥昔单抗类似物）筛选及耐药机制的理想模型。

活体动态监测： 传统的A431成瘤实验需要游标卡尺测量，误差大且无法监测内脏转移。A431-Luc通过生物发光成像（BLI），可以实时、无创地监测皮下或原位肿瘤的生长曲线及微小转移灶。

免疫肿瘤学： 常用于评估免疫检查点抑制剂或CAR-T细胞在体内的抗肿瘤活性。

培养操作手册

基础培养条件

培养基： DMEM (高糖) 基础培养基。

血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。

添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。

传代操作 (关键难点：消化时间)

A431细胞贴壁能力较强，且容易成团，消化是培养中的关键步骤。

观察： 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

清洗： 弃去旧培养基，用不含钙镁的 PBS 轻轻润洗一次。

消化： 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-0.02% EDTA)。

注意： A431的消化时间通常比普通细胞长，可能需要 2-4 分钟。请在显微镜下密切观察，待细胞间隙变大、大部分变圆并脱落时即可。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化（血清抑制胰酶活性）。

吹打： 必须用力吹打，将其分散成单细胞悬液，防止细胞抱团影响后续生长。

离心： 1000 rpm 离心 3-5 分钟。

重悬： 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬。

分瓶： 按 1:2 至 1:3 的比例传代。

冻存与复苏

冻存液： 推荐使用无血清冻存液或 90% 血清 + 10% DMSO。

复苏： 快速融化，离心去除冻存液，重悬接种。

A431-Luc 特有注意事项

抗生素维持（关键）：

为了防止荧光素酶基因在长期传代中丢失，必须定期使用嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选。

建议浓度： 通常维持浓度为 0.5 - 1.0 μg/mL（具体需根据实验室预实验确定）。如果不加压，你会发现细胞发光信号一代比一代弱。

细胞碎片问题：

A431细胞在培养过程中容易产生黑色的细胞碎片或代谢颗粒，这在高密度时尤为明显。只要细胞形态正常、贴壁良好，这些黑点通常不影响实验。

处理方法： 可以通过增加换液频率或用PBS润洗来清除。

STR鉴定：

收到细胞或冻存前，务必进行 STR 鉴定，确保细胞身份正宗，且与 ATCC 数据库匹配。

总结

A431-Luc = A431 (EGFR高表达) + Luc (活体可视化)。

它不仅保留了亲本细胞生长稳定、EGFR高表达的特性，还赋予了你实时监测肿瘤生长的能力。

公司正在出售的产品：

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。