荧光素酶/GFP标记的人套细胞淋巴瘤细胞;Jeko-1-Luc-GFP

产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母细胞来源：Jeko-1 细胞系建立于一位 78 岁女性套细胞淋巴瘤（MCL）患者的外周血单核细胞。

标记方式：通过慢病毒转染等技术，导入 Luc 和 GFP 基因。

GFP（绿色荧光蛋白）：用于荧光显微镜下直观观察细胞形态、纯度鉴定及流式分选。

Luc（荧光素酶）：用于活体成像，通过注射底物 D-Luciferin 后检测生物发光信号，定量监测细胞在动物体内的成瘤和转移情况。

关键病理特征：

EB 病毒阴性。

基因重排：存在 Bcl-1/J(H) 基因重排。

蛋白过表达：过表达 Cyclin D1、Bcl-2、c-Myc 及 Rb 蛋白（这是套细胞淋巴瘤的典型特征）。

免疫表型：CD3-、CD5+、CD10+、CD19+、CD20+。

核心参数速览

生物安全等级  BSL-1 / BSL-2

倍增时间  约 24-48 小时（具体视培养条件而定）

主要应用  淋巴瘤研究、活体成像、药物筛选、细胞移植模型

详细培养操作指南

Jeko-1-Luc-GFP 的培养核心在于维持悬浮状态和防止细胞聚团死亡。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

推荐培养基配方

不同供应商的配方略有差异，通用配方如下：

基础培养基：RPMI-1640 (最常用) 或 IMDM。

血清：10% - 20% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质血清）。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

其他：部分配方建议添加 1% 非必需氨基酸 (NEAA) 或 1% 钠丙酮酸。

传代与换液操作 (关键步骤)

观察密度：Jeko-1 细胞容易聚团，且对密度有依赖性。

正常状态：细胞应呈单个或小团簇悬浮，折光性强。

注意：若细胞团块过大或中间发黑，说明中心缺氧坏死。

传代时机：当细胞密度达到 80% - 90% 汇合度或细胞悬液浓度过高时进行传代。

传代方法：

离心法：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm (约 100-200g) 离心 5 分钟。弃上清，用新鲜预热的培养基重悬沉淀。

分装比例：按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶。

换液频率：建议 2-3 次/周。

技巧：Jeko-1 细胞贴壁较弱，换液时可直接吸取部分旧液，补充新液（半换液），或者离心后换液。

注意事项与常见问题

细胞聚团问题：

Jeko-1 细胞天然倾向于聚团生长。少量聚团是正常的，但过大的团块会导致内部细胞缺氧死亡。

解决方法：吹打时要轻柔地将大团块吹散，但不要过度吹打导致细胞膜破裂。

贴壁特性：

虽然被定义为悬浮细胞，但 Jeko-1 有时会有轻微的贴壁现象（半贴壁）。传代时若发现少量贴壁细胞，可用枪头轻轻吹打下来，不需要使用胰酶消化（除非贴壁非常牢固）。

荧光素酶与 GFP 稳定性：

长期培养过程中，双标记基因的表达可能会减弱。建议在实验前通过流式细胞术检测 GFP 阳性率，并通过体外荧光素酶活性检测确认 Luc 表达。

复苏与运输：

该细胞对运输和复苏比较敏感。收到细胞后，建议先离心去除冻存液中的 DMSO，再接种到新鲜培养基中。

总结：Jeko-1-Luc-GFP 是研究套细胞淋巴瘤活体成像和药物疗效的绝佳工具。它保留了母细胞的遗传特征，同时赋予了可视化追踪的能力。培养时请重点关注细胞密度和聚团情况，以维持其最佳生长状态。

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细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。