荧光素酶标记的人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞;CCRF-CEM-Luc 新品

产品信息：

细胞基本信息

别称：CCRF/CEM-Luc; CEM-Luc

种属来源：人（Homo sapiens）

供体信息：4岁女性（高加索人种），急性淋巴细胞白血病（ALL）

组织来源：外周血（Peripheral Blood），T淋巴母细胞

标记基因：荧光素酶（Luciferase, Luc），通常伴随抗性筛选基因（如嘌呤霉素/Puromycin 或 新霉素/Neomycin）。

生物安全等级：BSL-1（但建议按血液源性病原体标准操作）

细胞特性与应用

特征维度  详细描述

背景简介  该细胞系于1964年由 G.E. Foley 等人建立，是研究T细胞急性淋巴细胞白血病的经典模型。

免疫表型  T细胞标志物阳性：CD3, CD4, CD5, CD7。

标记特性  稳定表达荧光素酶，加入底物 D-luciferin 后可产生生物发光，适用于活体成像（In Vivo Imaging）和体外药敏实验。

主要应用  1. 白血病发病机制研究。

抗肿瘤药物筛选与药效评价（通过发光强度定量细胞数）。

免疫学与免疫肿瘤学研究。

建立白血病动物模型（如尾静脉注射建立全身性白血病模型）。

推荐培养体系

为了维持 CCRF-CEM-Luc 细胞的良好状态及荧光稳定性，建议使用以下培养条件：

基础培养基：RPMI-1640

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)

双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)

筛选维持：嘌呤霉素 (Puromycin) 或 G418 (Geneticin)（具体取决于构建质粒的抗性基因，通常为 Puromycin，浓度范围 1-10 μg/mL，需参考具体供应商说明书）。

培养环境：

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：维持培养箱内湿度 >90%。

详细培养操作指南

1. 细胞复苏 (Thawing)

预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。

解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，轻轻摇晃，使其在 1-2 分钟内 快速融化。

转移与清洗：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。将细胞悬液转移至含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中，轻轻混匀（稀释 DMSO 毒性）。

离心：1000 rpm (约 250g) 离心 3-5 分钟。

接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含筛选抗生素）重悬，接种至 T25 培养瓶或 6cm 皿中培养。

细胞传代 (Passage)

由于该细胞为悬浮细胞，通常不需要胰酶消化。

观察：当细胞密度达到  cells/mL（或镜下观察密度较高，培养基变黄）时进行传代。

收集：直接将细胞悬液转移至离心管中（若细胞密度过大，可先吸取部分细胞悬液进行计数和离心，保留部分旧液）。

离心：1000 rpm 离心 3-5 分钟。

换液：弃去上清液，加入新鲜完全培养基（含抗生素）重悬。

分瓶：按 1:2 至 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。

细胞冻存 (Freezing)

状态选择：选择对数生长期、活力高（>90%）的细胞。

计数：收集细胞，离心后重悬，进行细胞计数。

冻存液：推荐使用 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，或专用无血清冻存液。

程序降温：分装入冻存管，使用程序降温盒（-80℃ 过夜），然后转入液氮罐长期保存。

关键注意事项

荧光维持（重点）：CCRF-CEM-Luc 细胞在长期培养中，由于质粒丢失或基因沉默，荧光素酶的表达可能会减弱。为了保持稳定的荧光强度，必须在平时的培养基中添加筛选抗生素（如嘌呤霉素）。若发现荧光明显变弱，可进行短期的高浓度抗生素筛选。

勿直接倒掉培养基：这是悬浮细胞，细胞沉淀在离心管底部，但在培养瓶中可能悬浮或沉底。传代或换液时，千万不要直接将培养瓶中的液体倒掉，必须先将瓶内液体转移至离心管中离心收集细胞，否则细胞会随废液被丢弃。

生长速度：该细胞增殖速度较快，倍增时间约为 24-30 小时。请务必勤观察，防止细胞密度过大导致死亡。

无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。

支原体检测：定期检测支原体，支原体污染会严重影响细胞状态和实验结果。

公司正在出售的产品：

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1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶	PEA15 英文名称： 星形胶质细胞PEA15抗体 0.2ml
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MMP-28 英文名称： 基质金属蛋白酶28抗体 0.2ml	ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) 海葵神经毒素(35肽)Multi-class antibodies规格： 0.1mg
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Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	荧光素酶标记的人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞;CCRF-CEM-LucB7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配体1(多肽) 0.5mg
Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 荧光素标记0酸化肝细胞生长因子受体(原癌基因)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh PCDHA11 原钙粘蛋白11抗体 规格 0.2ml

细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。