荧光素酶标记的人软骨肉瘤细胞;SW1353-Luc

产品信息：

特征维度  详细信息

亲本来源  人软骨肉瘤细胞 (SW1353)

修饰方式  慢病毒转染携带 Luc 基因

标记物  稳定表达萤火虫荧光素酶

抗性筛选  通常携带嘌呤霉素 (Puromycin) 或博来霉素 (BSD) 抗性

种属/性别  人 (女性，72岁)

组织来源  右肱骨原发性Ⅱ级软骨肉瘤

生长特性  贴壁生长，成纤维细胞样 (梭形)

核心特性与应用

为什么要选择SW1353-Luc？

普通的SW1353细胞在动物体内无法追踪，而Luc标记让这一切变得直观。

活体示踪： 用于建立骨肉瘤/软骨肉瘤的裸鼠皮下瘤或骨转移模型。通过活体成像系统（IVIS），你可以实时观察肿瘤在小鼠体内的生长动力学、转移灶（如肺转移）的形成，而无需处死动物。

药物筛选： 利用发光信号的强弱来定量评估抗肿瘤药物（如靶向药、化疗药）对软骨肉瘤的杀伤效果。

机制研究： SW1353本身具有软骨细胞的分化特性，Luc标记后仍保留此特性，适合研究软骨肉瘤的侵袭机制及信号通路。

培养操作手册（保姆级）

培养条件 (这是SW1353最特殊的点！)

培养基： Leibovitz's L-15 培养基。

血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。

添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (双抗)。

环境： 37℃，空气环境 (100% Air)，无需 CO。

注意： L-15培养基的缓冲系统不同于DMEM/RPMI-1640，它不能利用碳酸氢钠/CO缓冲系统。因此，请务必使用透气性差的密封盖培养瓶，或者在普通培养瓶中培养时，需在培养箱内保持100%空气环境（部分实验室会通过每天换气来维持）。

传代操作

观察： 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

清洗： 弃去旧培养基，用不含钙镁的 PBS 轻轻润洗一次。

消化： 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-0.53mM EDTA)，放入37℃培养箱消化 1-2 分钟。

注意： SW1353贴壁相对较牢，消化时间可能比普通细胞稍长，请在显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时即可。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化（血清中的蛋白酶抑制剂会停止消化反应）。

离心： 1000 rpm 离心 3-5 分钟，弃上清。

重悬： 加入新鲜完全培养基，按 1:2 至 1:3 的比例传代。

冻存与复苏

冻存液： 推荐使用 无血清细胞冻存液 或 90% 血清 + 10% DMSO。

程序： 程序降温盒（或 -80℃ 过夜）转入液氮保存。

复苏： 快速融化，离心去除冻存液，重悬接种。

SW1353-Luc 特有注意事项

抗生素维持（关键）：

普通SW1353培养通常不需要抗生素维持。

SW1353-Luc 是经过抗性筛选构建的。为了防止长期培养后荧光素酶基因丢失（即发光越来越弱），建议在培养基中定期添加低浓度的嘌呤霉素 (Puromycin) 进行维持（通常 0.5-1.0 μg/mL，具体参考你构建或购买时的说明书）。

发光检测：

体外检测时，裂解细胞加入D-Luciferin底物；体内成像时，需给小鼠腹腔注射底物。

STR鉴定：

收到细胞或冻存前，务必进行 STR 鉴定，确保细胞身份正宗，且与 ATCC 数据库匹配。

总结

SW1353-Luc = SW1353 (软骨肉瘤模型) + Luc (活体可视化)。

它结合了SW1353细胞遗传背景稳定和Luc细胞可视化的优势，是研究软骨肉瘤生长、转移及药效评价的强有力工具。特别提醒你注意其独特的L-15培养基和无CO培养条件，这是养好该细胞的关键！

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细胞类型与特性

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。