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HOLO人白介素-2(IL-2)检测试剂盒

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K2101

产品活性：MCE HOLO 人白介素-2 (IL-2) 检测试剂盒是一种基于双抗体夹心的均相发光法定量检测缓冲液、细胞培养上清或血清等生物样本中人 IL-2 浓度的试剂盒。

描述及优势：白细胞介素-2 (IL-2)，又称 T 细胞生长因子 (TCGF)，是一种分子量为 15 - 18 kDa 的可变糖基化 α 螺旋多肽，属于常见的 γ 链 (γc) 细胞因子家族，通常以单体形式存在且半衰期极短 (+ 和 CD8+ T 细胞、神经元细胞、小胶质细胞和造血干细胞。 MCE HOLO 人白介素-2 (IL-2) 检测试剂盒是一种基于双抗体夹心的均相发光法定量检测缓冲液、细胞培养上清或血清等生物样本中人 IL-2 浓度的试剂盒。 检测原理为：将受体微球（IL-2 特异性抗体 1 交联）、IL-2 特异性抗体 2（生物素标记）、待测样本混合孵育，形成双抗体夹心的免疫复合物（抗体 1 - 样本 - 抗体 2）。免疫复合物再与供体磁珠（链霉亲和素交联）共孵育形成发光复合物，实现两种微球间距 200 nm 超出单线态氧的传递距离，受体微球均不产生发射光。 MCE HOLO 人白介素-2 (IL-2) 检测试剂盒具有如下特点： 1. 操作简便：实验简单快速，无需清洗、分离操作，匹配自动化仪器； 2. 检测范围宽：动态检测范围 0 - 100,000 pg/mL，检测线性范围 3.26 - 30,000 pg/mL； 3. 灵敏度高：样本用量小灵敏度高，特异性强，可实现高通量检测； 4. 兼容性：适用于细胞培养上清、缓冲液和血清等天然样本。

操作流程：样品预处理 若待测样本检测浓度超过试剂盒检测上限，建议适当稀释后检测。 1. 细胞培养上清：细胞培养上清液 1,000 × g 离心 10 min，收集上清液。 注：细胞培养液中应至少添加 1% FBS 或 0.1% BSA。 注：细胞培养液中应至少添加 1% FBS 或 0.1% BSA。 2. 血清：按常规方案收集血清样本即可。 注：待测样本为血清时，建议选择阴性血清复溶/稀释标准品，其中阴性血清中人 IL-2 含量应低于检测空白限（空白限浓度见附录）。 标准品准备 将 IL-2 标准品（冻干粉）用 50 μL 去离子水复溶，配制成 1 μg/mL 的母液，然后用稀释缓冲液将母液稀释成系列梯度浓度溶液。 检测 根据检测类型以下两种方案选一即可。 方案一（适用于缓冲液、DMEM 和胎牛血清等大部分常规培养体系中 IL-2 浓度检测） 1. 双抗体预混液制备：20 μL A + 20 μL B，混匀待用。 注：建议双抗体预混液制备后在 1 h 内使用完毕。 2. 免疫复合物制备：将 10 μL 标准品/待测样品加入到上述双抗体预混液中，混匀。37°C 孵育 15 min 或室温孵育 60 min。 注：孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜，防止液体挥发。 3. 发光复合物制备：在绿光或避光环境下，将 50 μL C. 供体微球（链霉亲和素交联）加入到上述免疫复合物体系中，37°C 孵育 10 min 或室温孵育 30 min。 注：a. 前后两次孵育温度需保持一致。 b. C. 供体微球（链霉亲和素交联）对光敏感，建议避光（光照度 c. 孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜，防止液体挥发。 4. 检测：将发光复合物置于均相化学发光仪或含 Alpha 模块的多功能酶标仪中进行仪器读数 RLU。 5. 标准曲线绘制：以 IL-2 浓度 (pg/mL) 为横坐标，RLU 为纵坐标绘制标准曲线。 注：建议每次检测重新绘制标准曲线，标准品每个浓度做 2 - 3 个复孔。 6. 计算：根据标准曲线计算出待测样品中 IL-2 浓度。 方案二（适用于 RPMI 培养体系中 IL-2 浓度检测） 1. 双抗体预混液制备：在绿光或避光环境下，20 μL A + 20 μL B + 20 μL C，充分混匀，室温孵育 30 min。 注：a. C. 供体微球（链霉亲和素交联）对光敏感，建议避光（光照度 b. 孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜，防止液体挥发。 2. 发光复合物制备：在绿光或避光环境下，将 10 μL 标准品/待测样品加入到上述预混液中，37°C 孵育 25 min。 注：孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜，防止液体挥发。 3. 检测：将发光复合物置于均相化学发光仪或含 Alpha 模块的多功能酶标仪中进行仪器读数 RLU。 4. 标准曲线绘制：以 IL-2 浓度 (pg/mL) 为横坐标，RLU 为纵坐标绘制标准曲线。 注：建议每次检测重新绘制标准曲线，标准品每个浓度做 2 - 3 个复孔。 5. 根据标准曲线计算出待测样品中 IL-2 浓度。

详情参考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/holo-human-interleukin-2-il-2-detection-kit.html