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High Sensitivity ECL Kit

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K2005

中文名称：超敏 ECL 化学发光试剂盒

存储条件：4°C, 1年避光保存

产品活性：超敏 ECL 化学发光试剂盒可用于检测辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗体及其关联的抗原。

生物活性：MCE 超敏 ECL 化学发光试剂盒用于检测辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗体及其关联的抗原。HRP 标记的抗体直接或间接结合膜上的目的蛋白，在洗膜后加入本试剂盒配制的 ECL 工作液，即可由 HRP 催化产生化学发光，结果可通过 X 光胶片压片或 CCD 成像系统进行检测。 本产品配方独特，灵敏度高，对抗原的最低检测限度可达低皮克级别，6-8 小时内检测信号仍保持稳定。本产品配方经过优化，适用于极低浓度的抗体检测，在 WB 实验中，一抗 (1 mg/mL) 储存液可稀释 1:1,000-1:50,000 倍 (终浓度约 0.2-1 μg/mL)，二抗 (1 mg/mL) 储存液可稀释 1:20,000-1:100,000 倍 (终浓度约10-50 ng/mL)。持久的发光信号，极高的信噪比，保证了最佳的检测效果。

描述及优势：

MCE 超敏 ECL 化学发光试剂盒用于检测辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗体及其关联的抗原。HRP 标记的抗体直接或间接结合膜上的目的蛋白，在洗膜后加入本试剂盒配制的 ECL 工作液，即可由 HRP 催化产生化学发光，结果可通过 X 光胶片压片或 CCD 成像系统进行检测。

本产品配方独特，灵敏度高，对抗原的最低检测限度可达低皮克级别，6-8 小时内检测信号仍保持稳定。本产品配方经过优化，适用于极低浓度的抗体检测，在 WB 实验中，一抗 (1 mg/mL) 储存液可稀释 1:1,000-1:50,000 倍 (终浓度约 0.2-1 μg/mL)，二抗 (1 mg/mL) 储存液可稀释 1:20,000-1:100,000 倍 (终浓度约10-50 ng/mL)。持久的发光信号，极高的信噪比，保证了最佳的检测效果。

操作流程：1. 进行常规 WB 操作：电泳、转膜、封闭、HRP 标记抗体孵育、洗膜。一抗 (0.2-1 μg/mL) 室温孵育 1 h 或 4°C 过夜，洗膜后，二抗 (10-50 ng/mL) 室温孵育 30-60 min。 2. . 配制 ECL 工作液：在使用前等量混合适量 A 液和 B 液，混合后尽快使用。 3. Western 二抗孵育后，进行数次洗涤，用平头镊子将印迹膜取出，沥干膜上的洗膜液，将结合有蛋白的一面朝上，放置于洁净保鲜膜上。 4. 根据印迹膜的大小，按 0.125 mL 工作液/cm2 膜的比例滴加 ECL 工作液到膜上，确保工作液均匀覆盖在整张膜上，室温孵育 3-5 min。 5. 弃去印迹膜上的 ECL 工作液，用吸水纸吸去过多的液体。将印迹膜放在两片保鲜膜中间，随后进行压片检测或成像仪检测。 6. 压片检测：将印迹膜固定于片夹内。暗室内压片 1 分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接压片 30 秒、1、3、5 分钟，然后一起显影定影观察结果。 7. 荧光成像仪检测：将印迹膜放置到荧光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。

详情参考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/high-sensitivity-ecl-kit.html