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Anti-His 磁珠

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K0209

中文名称：Anti-His 磁珠

存储条件：4°C，2年请勿离心、干燥或冷冻磁珠。

产品活性：MCE Anti-His 磁珠用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 His 标签蛋白的免疫沉淀（IP）实验。

生物活性：MCE Anti-His 磁珠由高质量的鼠源单克隆 Anti-His 抗体和纳米磁珠共价偶联制备，具有较高的 His 标签融合蛋白加载容量 (> 0.5 mg 蛋白/mL)，可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 His 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 产品特性 内容物 高质量 Anti-His 单克隆抗体偶联磁珠 磁珠直径 200 nm 载量 > 0.5 mg protein/mL of beads 适用范围 免疫沉淀 (IP)，免疫共沉淀 (Co-IP)，His-tag 蛋白纯化 推荐使用体积 每 500 μL 细胞裂解液使用 25 μL 磁珠

描述及优势：

MCE Anti-His 磁珠由高质量的鼠源单克隆 Anti-His 抗体和纳米磁珠共价偶联制备，具有较高的 His 标签融合蛋白加载容量 (> 0.5 mg 蛋白/mL)，可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 His 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。

操作流程：1. 抗原样品制备根据不同的样品选择合适的处理方法2. 磁珠预处理混悬 Anti-His 磁珠，取 25 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中，加入 500 μL 洗涤缓冲液，充分混悬，置于磁力架上磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤 2 次。3. 样品的结合在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 细胞裂解液，充分混悬，置于翻转混合仪孵育，室温孵育 2 小时或者 4℃ 条件下孵育过夜。置于磁力架上磁性分离，弃上清。注： 结合过程中，磁珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象，不会影响实验结果。4. 洗涤在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 洗涤缓冲液，充分混悬磁珠，磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤 3 次，直到洗涤后的上清液中 OD280 小于0.05 为止。注： 如上清液的 OD280 大于 0.05，适当增加洗涤次数即可。5. 洗脱本说明书提供三种 Flag 标签蛋白洗脱方案，操作者可以根据后期检测的需要选择不同的洗脱方案。1) 变性洗脱法：此方法洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 检测。步骤：分离磁珠，弃上清，向磁珠中加入 100 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均匀，95°C 加热 5 分钟。分离磁珠，收集上清至新的 EP 管，进行 SDS-PAGE 检测。2) 酸性洗脱法：此方法洗脱的样品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步骤：分离磁珠，弃上清，向磁珠中加入 100 μL 的洗脱缓冲液 A 混合均匀，室温孵育 10 分钟。分离磁珠，收集上清至新的 EP 管，按每 100 μL 洗脱液加入 10-20 μL 中和缓冲液的比例加入中和缓冲液，将洗脱产物 pH 调节至中性，样品用于后期功能分析。3) 竞争性洗脱法：此方法洗脱的样品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步骤：分离磁珠，弃上清，向磁珠中加入 3-5 倍磁珠体积的洗脱缓冲液 B 混合均匀，室温孵育 1 小时或者 4°C 条件下孵育 1-2 小时。分离磁珠，收集上清至新的 EP 管，即为目的蛋白，样品用于后期功能分析。

详情参考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/anti-his-magnetic-beads.html