MKN-45-eGFP-LUC；人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记

MKN-45-eGFP-LUC；人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记

商品属性

母系来源 MKN-45 (人胃癌细胞)

标记基因 eGFP (绿色荧光蛋白) + LUC (荧光素酶)

抗性基因 通常携带 Puro (嘌呤霉素) 抗性

物种来源 人 (Homo sapiens)

组织来源 胃淋巴结转移灶（印戒细胞癌）

细胞形态 多形型

生长特性 半贴壁/半悬浮 (需收集悬浮细胞)

培养基 RPMI-1640 + 10% FBS

细胞背景与核心特性

母系来源与病理背景

MKN-45 细胞系由 S. Akiyama 于 1985 年建立，源自一位 35岁女性胃癌患者的淋巴结转移灶（病理类型为印戒细胞癌）。

它属于低分化胃腺癌模型，具有高度恶性特征，常用于研究胃癌的侵袭和转移机制。

注意：该细胞系 HPV 检测阴性，且不表达 EB 病毒相关抗原。

核心特性（双标记优势）

eGFP (绿色荧光蛋白)：

用途：用于体外检测。在荧光显微镜下可直接观察细胞形态、定位及分选（流式细胞术）。

优势：实时、无损、无需染色。

LUC (荧光素酶)：

用途：用于体内及体外定量。注入底物（D-luciferin）后产生生物发光。

优势：活体成像。可实时、定量监测裸鼠体内肿瘤的生长、转移及药物治疗后的肿瘤负荷变化，灵敏度极高。

双重验证：eGFP 用于定性观察，LUC 用于精确定量，两者结合可提供最可靠的实验数据。

科研应用价值

原位移植瘤模型：利用其高侵袭性，构建胃癌原位模型，实时监测肿瘤在胃壁的生长及腹膜、肝脏转移。

药物筛选与评价：利用荧光/发光信号快速评估药物（如化疗药、靶向药、纳米药物）的体内外疗效。

转移机制研究：结合活体成像，实时追踪癌细胞的播散路径。

细胞特性

来源：人细胞系MKN-45，经基因工程改造，稳定表达增强型绿色荧光蛋白（eGFP）和荧光素酶（LUC），适用于活体成像、肿瘤转移追踪及药物筛选研究。

标记特性：

eGFP：可通过荧光显微镜直接观察细胞定位与分布。

LUC：需注射荧光素底物（如D-荧光素），通过生物发光成像系统检测信号强度。

安全性：需在二级生物安全柜中操作，废液及接触器皿需高压灭菌处理。

培养条件

培养基：90% RPMI-1640 + 10%胎牛血清，补充0.1 μg/mL嘌呤霉素（维持筛选压力）。

培养环境：37℃、5% CO₂，悬浮生长。

传代方法：

细胞未长满时，更换新鲜培养基继续培养；

细胞长满后，离心重悬分瓶（建议传代比例1:2至1:3）。

质量控制

STR鉴定：提供STR分型报告，确保细胞株唯一性。

无菌检测：支原体、细菌、真菌检测均为阴性。

注意事项

需定期检测标记基因表达稳定性，避免长时间培养导致信号衰减。

活体实验需遵守动物伦理规范，荧光素底物注射剂量需优化。
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