HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞

商品属性

英文名称：Immortalized Human Cerebral Microvascular Endothelial Cells (HCMEC/D3)

种属来源：人

组织来源：大脑颞叶微（源自癫痫手术切除组织）

细胞形态：内皮细胞样，呈梭状、细长型，贴壁生长

用途：血脑屏障（BBB）研究、药物转运机制分析、病原体感染及反应模型构建等科研用途。

细胞特性

永生化机制：

通过慢病毒载体转导人端粒酶催化亚基（hTERT）和SV40大T抗原实现连续永生化。

经有限稀释克隆筛选及脑内皮表型验证，确保细胞稳定性。

性能参数：

细胞含量：≥1×10^6 cells/mL（冻存管）或T25培养瓶规格。

纯度：富含脑内皮细胞标志物（如紧密连接蛋白、转运体等）。

培养条件

基础培养基：专用永生化人脑微内皮细胞基础培养基。

添加组分：5%胎牛血清（FBS）+ 1%内皮细胞生长因子。

传代比例：1:2至1:4（建议每2-3天换液一次，密度达80%时传代）。

消化试剂：0.25%胰蛋白酶（建议传代时使用）。

运输与保存

冻存细胞（1mL冻存管）：

干冰运输，接收后立即转入-80℃冰箱保存（过夜后转液氮）或直接复苏。

如发现干冰挥发、管体破损或污染，需及时联系。

复苏细胞（T25瓶）：

常温运输，接收后按标准无菌操作处理（酒精消毒瓶体、显微镜观察污染）。

操作注意事项

复苏与传代

离心收集细胞后，用1×PBS清洗两遍，更换新鲜培养基。

成团细胞建议胰酶消化后传代。

污染控制：

使用75%酒精消毒培养瓶表面，观察培养基浑浊度及细胞形态。

发现污染需立即终止实验并联系技术支持。

质量控制

无菌检测：支原体、细菌、真菌检测阴性。

功能验证：血脑屏障相关标志物（如P-gp、GLUT-1）表达阳性。

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