猫免疫缺陷病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，用于特异性检测猫免疫缺陷病毒（FIV）的核酸。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

规格及组分

探针法qRT-PCR缓冲液：500 μL

探针法qRT-PCR酶混合液：100 μL

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL

FIV探针法qRT-PCR引物混合液：100 μL

FIV qRT-PCR探针：50 μL

FIV阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）：50 μL

说明书：1份

储存条件

-20℃避光保存，有效期12个月。运输需低温环境。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，如ABI系列、Bio-Rad、LightCycler等。

自备试剂与耗材

无核酸酶的离心管、PCR反应管、滤芯吸头（10/200/1000 μL）

离心机、振荡器、移液器

RNA提取试剂（推荐柱式病毒RNA提取试剂盒）

样品要求

样本类型：全血、血清、组织（如淋巴结）或病毒培养物。

保存条件：短期-20℃，长期-70℃（避免反复冻融）。

运输：2~8℃冰袋运输。

操作步骤

1. 标准曲线制备（10²~10⁷拷贝/μL梯度）

阳性对照按10倍梯度稀释（需独立操作区），分装后冰上保存。

2. 样品RNA提取

设置N+2个提取（含阴/阳性对照），推荐使用商品化RNA提取试剂盒。

3. PCR反应体系（20 μL/管）

| 成分 | 样品管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |

| qRT-PCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |

| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |

| FIV探针 | 1 | 1 | 1 |

| 引物混合液 | 2 | 2 | 2 |

| 样品RNA/标准品/水 | 5 | 5（水） | 5（标准品） |

4. 反应程序

逆转录：50℃ 30 min

预变性：94℃ 10 min

PCR循环（40次）：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号）

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。

定性检测：阴性对照Ct值≥40，阳性对照需有显著扩增曲线。

注意事项

不同批号组分不可混用。

操作分区进行（样本处理、试剂配制、扩增区），避免污染。

阳性对照为无传染性DNA片段，需严格按规范稀释。

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