山羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

山羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

用于检测鲍鱼等样本中山羊源性成分的DNA，适用于科研实验，不可用于临床诊断。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。

产品特点

高特异性：引物基于山羊源性成分保守序列设计，与其他病毒无交叉反应。

高灵敏度：检测下限达10~100拷贝/反应。

操作简便：即开即用，一管式荧光定量PCR，减少污染风险。

对照齐全：含阳性对照（1×10^8拷贝/μL）及阴性对照，便于结果判读。

高通量兼容：可适配双重或三重PCR检测体系。

试剂盒组成

核心组分：

探针法qPCR缓冲液（黄盖）

酶混合液（红盖）

荧光PCR专用模板稀释液（黄盖）

引物混合液（白盖）

探针（棕色管）

阳性对照（1×10^8拷贝/μL，黄盖）

核酸释释剂（试用装，绿盖）

自备耗材：带滤芯吸头、离心管、冰盒等。

实验操作流程

标准曲线制备（以10^2~10^7拷贝/μL梯度为例）：

标记6管，分别加入45μL稀释液。

从阳性对照中取5μL加入第1管（10^7拷贝/μL），依次10倍稀释至第6管（10^2拷贝/μL）。

第7管为阴性对照（仅稀释液）。

样品DNA制备：

使用配套裂解液或兼容的核酸提取方法，确保DNA纯度符合PCR要求。

PCR扩增：

反应体系：20μL/反应，含模板DNA、引物、探针及缓冲液。

循环条件：预变性（95℃, 2min）→ 扩增（95℃ 10s, 60℃ 30s，40循环）。

结果分析

标准曲线：以Ct值为纵坐标，拷贝数对数为横坐标，R²应≥0.98。

判读标准：

阳性：Ct值＜30；

可疑：Ct值30~35，需复测；

阴性：Ct值≥35或无Ct值。

注意事项

防污染措施：

分区操作（试剂配制、样本处理、扩增区分离）。

使用带滤芯吸头，避免气溶胶污染。

试剂稳定性：避免反复冻融，解冻后需充分混匀。

适用范围：仅限科研，不可用于临床或食品检测。

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