猪输血传播病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于检测猪输血传播病毒（PTTV）的核酸，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。试剂盒包含优化的引物、探针及对照体系，可实现高灵敏度、高特异性的定性或定量检测，线性范围达5个数量级。

规格与成分

| 成分 | 规格 |

| qPCR缓冲液 | 500 μL |

| qPCR酶混合液 | 100 μL |

| 模板稀释液 | 1 mL |

| PTTV引物混合液 | 100 μL |

| PTTV探针 | 50 μL |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL |

| 说明书 | 1份 |

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

实验流程

样本制备

DNA提取：使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA。

标准曲线稀释（定量检测需选做）：

标记6管（7-2号），每管加45 μL稀释液。

梯度稀释阳性对照（10⁸拷贝/μL起始），依次获得10⁷至10²拷贝/μL的标准品。

qPCR反应体系（20 μL/反应）

| 成分 | 体积（μL） |

| qPCR缓冲液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 探针 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA/标准品/对照 | 5 |

阴性对照：以超纯水替代模板。

扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 逆转录 | 50℃ | 30 min |

| 预变性 | 94℃ | 10 min |

| 40循环 | 94℃ | 15 sec |

| | 60℃ | 1 min（采集FAM信号） |

结果判读

定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性分析：

阳性：Ct值<35，呈S型扩增曲线。

阴性：Ct值≥38或无扩增。

可疑：Ct值35-38需复检。

注意事项

分区操作：样本制备、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免污染。

使用带芯枪头及专用工作服，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。

试剂使用前需完全融化并离心混匀，避免反复冻融。

阳性对照需单独存放，防止污染其他组分。

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