猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型NADC32株探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品特点

高灵敏度与特异性：

引物及探针针对NADC32株保守区设计，避免与其他病毒RNA交叉反应。

检测下限可达10^1–10^2拷贝/μL。

即开即用：预混反应体系，仅需提供样本RNA模板。

质控完善：含阳性质控品（5.59×10^4拷贝/μL）和阴性质控品，确保结果可靠性。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

试剂盒组分

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | NADC30-like PRRSV扩增液 | 50μL×1管 |

| 试剂二 | NADC30-like PRRSV反应液 | 950μL×1管 |

| 试剂三 | 阳性质控品（5.59×10^4拷贝/μL） | 50μL×1管 |

| 试剂四 | 阴性质控品 | 50μL×1管 |

| - | 说明书 | 1份 |

注：

需自备无核酸酶离心管、滤芯吸头、荧光定量PCR仪等耗材设备。

不同批号组分不可混用，禁止与其他品牌试剂混合。

储存与运输

储存条件：-15℃以下避光保存，有效期12个月。

运输条件：泡沫盒加冰袋（≤8℃），避免反复冻融（≤5次）。

操作步骤

1. 样本处理

组织样本：取1g组织匀浆后离心取上清；血液样本：分离血清。

RNA提取：推荐使用商品化病毒RNA提取试剂盒，提取后-15℃保存。

2. 试剂配制

解冻后涡旋混匀，按N（样本数+2质控）配制反应体系：

反应液19μL + 扩增液1μL/管，分装至PCR管。

3. 加样与扩增

加入5μL模板RNA，设置阴性/阳性对照。

PCR程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 逆转录 | 50℃ | 30 min |

| 预变性 | 94℃ | 10 min |

| 40循环 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |

结果分析

定量检测：以标准曲线（10^1–10^6拷贝/μL）计算样本浓度。

定性检测：

Ct≤39为阳性；Ct≥40为阴性；39<Ct<40需复测。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。

使用一次性耗材，实验后消毒台面及移液器。

若样本出现抑制或降解，可能导致假阴性。

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