蛇源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

蛇源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于蛇源性成分的定性与定量检测。适用于科研用途，具有高灵敏性、高特异性及操作便捷性，可兼容多数核酸纯化方法。

试剂盒组成

荧光PCR反应液（含优化引物及探针）

阳性对照（1×10^8拷贝/μL，无传染性DNA片段）

阴性对照（无核酸酶水）

标准曲线稀释液

其他辅助试剂（详细组分以实际说明书为准）

操作流程

标准曲线制备（定量分析）

标记离心管：编号6管（7至2号或6至1号，依版本不同）。

梯度稀释：

7号管加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL）与45 μL稀释液，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品。

依次稀释至1×10^2拷贝/μL，冰上保存。

样本DNA制备

使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA，设置N+2管（含阳性/阴性对照）。

阳性对照建议使用试剂盒提供的DNA片段稀释液。

qPCR反应体系（20 μL/反应）

定量分析：需N+9管（N+2样本管、6标准曲线管、1阴性对照管）。

定性分析：仅需N+4管（N+2样本管、1标准曲线管、1阴性对照管）。

反应条件：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增：40循环（95℃ 15秒，60℃ 60秒，荧光采集）。

数据分析

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：

阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30（或36，依版本不同）。

样本Ct≤35为阳性，≥40为阴性；35-40需复测确认。

注意事项

分区操作：试剂配制、样本处理、扩增需在独立区域进行，避免交叉污染。

防降解措施：样本处理需在0-4℃下完成，使用无核酶耗材。

质控要求：每实验必须包含阴/阳性对照。

保存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。

适用仪器

兼容ABI系列荧光定量PCR仪（参数设置：无ROX校正，淬灭基因选择None）。

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