白附子探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，通过特异性引物和TaqMan探针实现对白附子（Rhizoma typhonii）DNA/RNA的高灵敏、高特异性检测。适用于定性或定量分析，线性范围达5个数量级（10^1–10^7拷贝/μL）。

试剂盒成分

探针法qPCR缓冲液（500μL）

qPCR酶混合液（50μL）

荧光PCR模板稀释液（1mL）

引物-探针干粉（50T）

阳性对照（10^7拷贝/μL，50μL）

生物版本：

qRT-PCR缓冲液（500μL）

酶混合液（100μL）

引物混合液（100μL）

qPCR探针（50μL）

阳性对照（10^8拷贝/μL，50μL）

操作流程

标准曲线制备（6个10倍梯度稀释）：

使用阳性对照依次稀释至10^1–10^6拷贝/μL或10^2–10^7拷贝/μL，独立操作避免污染。

样本制备：

提取待测样本DNA/RNA，推荐配套提取试剂盒，设置阴性/阳性对照。

qPCR反应体系（20μL）：

| 成分 | 样本管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |

| qPCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 探针/引物混合液 | 1–2μL | 1–2μL | 1–2μL |

| 模板 | 5μL | — | — |

| 标准稀释液/超纯水 | — | 5μL | 5μL |

反应程序：

逆转录（50℃ 30min，若检测RNA）→ 预变性（94℃ 10min）→ 40循环（94℃ 15s，60℃ 1min，采集FAM信号）。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值（39–40）需复测。

注意事项

严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。

使用带滤芯枪头，反应液避光保存，避免气泡。

实验后需用10%次氯酸或75%乙醇消毒工作台。

检测局限性：

基因突变或提取效率差异可能导致假阴性；

污染可能导致假阳性。

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