白及探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品特点

即开即用：预混含探针的荧光定量PCR MasterMix（含Taq酶、dNTPs、缓冲液等），用户仅需提供DNA模板及引物。

高特异性：探针与引物针对白及（Rhizoma bletillae）保守序列设计，无交叉反应。

灵敏度高：检测线性范围达5个数量级（10¹–10⁶拷贝/μL），适用于微量样本。

双重检测模式：支持定性与定量分析，含阳性对照（无传染性DNA片段，10⁸拷贝/μL）和阴性对照。

防污染设计：含UNG酶（可选）以预防残留污染，推荐使用带芯枪头操作。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 用途说明 |

| 荧光定量PCR MasterMix | 1 mL（红盖） | 含探针、Taq酶、dNTPs等 |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | 反应体系稀释 |

| 白及引物探针混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性扩增目标序列 |

| 阳性对照（10⁸拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | 标准曲线建立及质控 |

| 核酸释放剂（试用装）| 1 mL（绿盖） | 可选核酸提取 |

| 使用手册 | 1份 | 操作流程及数据分析 |

操作步骤

1. 标准曲线制备（定量分析）

将阳性对照按10倍梯度稀释（10⁶–10¹拷贝/μL），每个稀释度独立分装，冰上操作避免污染。

2. 样本DNA制备

使用柱式提取法或试剂盒配套核酸释放剂提取样本DNA，建议设置阴性/阳性提取对照。

3. PCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× MasterMix | 10 |

| 引物探针混合液 | 0.8 |

| DNA模板 | 2 |

| 超纯水 | 补足至20 |

4. 扩增程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40个循环），荧光信号采集于退火阶段。

5. 数据分析

定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本拷贝数。

定性：Ct≤36为阳性，Ct≥40为阴性，36<Ct<40需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域进行，避免气溶胶污染。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板）和阳性对照。

保存要求：MasterMix需避光，解冻后短暂离心混匀，避免反复冻融。

废弃物处理：实验后使用10%次氯酸或75%乙醇清洁台面及移液器。

应用范围

科研用途：白及物种鉴定、基因表达分析等，不可用于临床诊断。

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