白前探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品用途

白前（Cynanchum stauntonii）种源性基因检测，仅限科研使用，不可用于临床。

技术原理

基于实时荧光定量PCR（qPCR）探针法：

探针设计：5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团，通过Taq酶切割探针释放荧光信号，实现靶序列的定量与定性分析。

检测流程：反转录（RNA模板）、扩增（40个循环）、荧光信号采集（FAM通道）。

产品组成

| 成分 | 规格/功能 |

| qRT-PCR缓冲液 | 500μL（提供反应体系基础环境） |

| qRT-PCR酶混合液 | 100μL（含逆转录酶及Taq酶） |

| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL（用于标准曲线稀释） |

| 引物混合液 | 100μL（白前特异性引物） |

| qRT-PCR探针 | 50μL（标记荧光基团） |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL（用于标准曲线建立） |

| 说明书 | 1份 |

操作步骤

标准曲线制备：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10⁷~10²拷贝/μL），分装至标记管中。

RNA提取：

使用兼容的RNA提取试剂盒制备样本，建议设置阴性/阳性对照。

PCR反应体系配制（20μL/管）：

依次加入缓冲液（10μL）、酶混合液（2μL）、探针（1μL）、引物（2μL）、模板RNA（5μL）。

扩增程序：

逆转录：50℃ 30分钟 → 预变性：94℃ 10分钟 → 40循环（94℃ 15秒，60℃ 1分钟，采集荧光）。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：

阳性：Ct≤35，扩增曲线呈S型；

阴性：Ct≥40；

可疑（35<Ct<40）：需复测确认。

储存与运输

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输要求：低温（冰袋+泡沫箱）密封运输，避免反复冻融。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），防止交叉污染。

使用无核酸酶耗材（带芯枪头、离心管）。

阳性对照需单独存放，避免污染其他组分。

实验废弃物需经消毒处理（次氯酸或紫外线）。

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