白薇探针法PCR鉴定试剂盒 新品

预期用途

用于白薇核酸的定性或定量检测，适用于科研用途，不适用于临床诊断。

检验原理

基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对白薇基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团，PCR扩增时Taq酶切割探针释放荧光信号，通过荧光定量PCR仪监测信号强度，实现靶序列的定性与定量分析。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格/包装量 |

| 白薇扩增液 | 25μL ×1管 |

| 白薇反应液 | 975μL ×1管 |

| 阳性质控品（人工DNA片段） | 50μL ×1管（1×10^8拷贝/μL） |

| 阴性质控品 | 50μL ×1管 |

| 说明书 | 1份 |

注意：不同批号组分不可混用，避免反复冻融（≤7次）。

储存与运输

储存条件：-20℃±5℃避光保存，有效期12个月。

运输条件：低温（-20℃）运输，避免高温或反复冻融。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI系列、Bio-Rad CFX、LightCycler等），需配合无核酸酶耗材（离心管、滤芯吸头等）。

样本要求

样本类型：全血、血清、组织（如肠道）、拭子等。

处理要求：

短期保存：-20℃；长期保存：-70℃（≤6个月）。

运输：2~8℃冰袋，禁止反复冻融。

核酸提取：推荐使用商品化DNA提取试剂盒。

操作步骤

标准曲线制备（定量检测需选做）：

将阳性质控品10倍梯度稀释（10^1~10^7拷贝/μL），分装至标记管中。

PCR反应体系配制（20μL/反应）：

| 组分 | 体积/反应 |

| 反应液 | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL |

| 探针 | 1μL |

| 引物混合液 | 2μL |

| 模板DNA/标准品/对照 | 5μL |

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 3分钟；

40循环：95℃ 15秒 → 55-60℃ 30秒（采集FAM通道信号）。

结果判读

定性检测：

阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈S型；

阴性：Ct值≥40或无扩增；

可疑（35<Ct<40）：需复检。

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。

注意事项

实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免污染。

阳性对照需最后加样，防止气溶胶污染。

本产品仅限科研使用，严禁用于临床。

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