白鲜皮探针法PCR鉴定试剂盒 新品

技术原理与特点

原理：基于探针法荧光定量PCR技术，通过特异性引物和FAM标记探针靶向扩增白鲜皮基因组中560 bp的保守序列，结合实时荧光信号检测实现定性与定量分析。

特点：

高特异性：引物及探针经优化设计，仅扩增白鲜皮DNA，无交叉反应。

高灵敏度：最低检测限达10 ng DNA模板。

快速简便：预混试剂即开即用，3小时内完成检测，PCR产物可直接电泳。

防污染设计：含dUTP/UDG酶系统（部分型号），降低假阳性风险。

试剂盒组分

| 成分 | 规格/包装 | 用途说明 |

| PCR预混液（含探针） | 1 mL（2×浓度） | 含Taq酶、dNTPs、Mg²⁺ |

| 阳性对照DNA | 50 μL（1×10⁸拷贝/μL） | 标准曲线制备与质控 |

| 阴性对照 | 1 mL | 排除污染及体系验证 |

| 核酸释放剂（可选） | 1 mL | 简化样本前处理 |

| 使用说明书 | 1份 | 操作流程与数据分析 |

操作步骤

样本制备：

使用柱式法或试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥50 ng/μL。

阳性对照需梯度稀释（10⁶~10¹拷贝/μL）以绘制标准曲线。

PCR反应体系（25 μL）：

预混液（2×）     12.5 μL  

引物/探针混合液   1 μL  

DNA模板          2 μL  

ddH₂O            补至25 μL  

扩增程序（ABI 7500为例）：

50℃ 10 min（UDG处理，可选）

95℃ 3 min（预变性）

95℃ 10 sec → 60℃ 1 min（荧光采集），共40循环。

结果分析

阈值设定：阈值线需高于阴性对照扩增曲线最高点。

质控标准：

阴性对照：Ct≥40或无Ct值。

阳性对照：Ct≤35且呈典型S型曲线。

判读规则：

阳性：Ct<38，指数期明显。

可疑：38≤Ct<40，需复测确认。

阴性：Ct≥40或无扩增。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域进行，避免交叉污染。

试剂解冻后需涡旋混匀并短暂离心，避免反复冻融。

实验废弃物需经10%次氯酸或75%乙醇消毒处理。

应用范围

科研用途：白鲜皮药材真伪鉴定、物种特异性分析等。

不适用于：临床诊断或医疗用途。

公司正在出售的产品