羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，专用于定性检测肉制品、内脏、动物饲料等样本中的羊源性核酸成分。适用于食品真实性验证、质量监管、饲料安全检测及科研教学等领域，确保产品标签合规性并防止交叉污染。

检测原理

采用探针法荧光定量PCR技术：

标准品构建：将参照基因（如管家基因RPPH1）与羊源性目的基因按1:1比例克隆至pMD18-T载体，制备梯度稀释的标准品。

同步扩增：待测样本与标准品同步进行实时荧光PCR扩增，通过FAM通道检测荧光信号。

定量分析：根据标准曲线计算目的基因与参照基因拷贝数比值，实现羊源性成分的相对定量。

样本要求

适用样本类型：肉类、加工食品、内脏、动物饲料等。

样本处理：需使用核酸提取试剂盒提取样本DNA，建议提取后立即检测或-20℃保存。

操作步骤

试剂准备

在反应管中加入20 μL缓冲液，涡旋混匀。

加样

分别加入5 μL阴性对照、待测样本及阳性对照（阳性对照需预混5 μL缓冲液）。

PCR扩增

设置扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集FAM荧光信号）。

结果分析

通过仪器软件分析Ct值，判定样本中羊源性成分的存在与否。

注意事项

质量控制：每批次检测需包含阴/阳性对照，确保试剂有效性。

污染防控：分区操作（样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。

储存条件：试剂盒-20℃避光保存，避免反复冻融。

性能参数

灵敏度：可检测低至0.1%的羊源性成分。

特异性：与牛、猪等常见动物源性成分无交叉反应。

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