鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术，专为检测食品、生物样本或其他材料中的裸盖鱼源性成分设计。通过特异性引物和探针靶向裸盖鱼保守基因序列，实现高灵敏度、高特异性的定性与定量检测，适用于科研领域。

产品参数

规格：50T/盒（20μL反应体系）

检测方法：实时荧光定量PCR（TaqMan探针法）

灵敏度：

混合样品中裸盖鱼成分检测下限：0.01%（w/w）

核酸浓度检测下限：0.1 ng/μL

线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12–24个月。

试剂盒组成

核心组分：

2× Probe qPCR MasterMix（含热启动DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等）

裸盖鱼特异性引物-探针干粉（FAM标记，BHQ淬灭）

阳性对照（1×10^7拷贝/μL裸盖鱼DNA片段）

阴性对照（无核酸酶水）

荧光PCR专用模板稀释液

辅助材料：

使用说明书（含标准曲线制备方法）

实验流程

1. 标准曲线制备（定量检测）

稀释阳性对照：按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），独立操作避免污染。

加样体系：

| 成分 | 体积（μL） |

| 2× Probe MasterMix | 10 |

| 引物-探针混合液 | 3 |

| 模板DNA/标准品 | 7 |

2. 样本DNA提取

推荐使用商品化DNA提取试剂盒，避免交叉污染。

阴性/阳性对照需同步提取。

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 45 |

| | 60℃ | 60 sec（采集FAM信号） |

4. 数据分析

定量分析：通过标准曲线计算样本拷贝数。

定性分析：

阳性判定：Ct值＜40，且扩增曲线符合指数增长。

阴性判定：无Ct值或Ct值≥40。

注意事项

操作规范：

分设试剂配制区、样本处理区、扩增区，使用滤芯吸头。

避免反复冻融试剂，分装保存。

质量控制：

每批次实验需包含阴/阳性对照。

标准曲线R²应≥0.98。

适用范围：仅限科研用途，不适用于临床诊断。

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