榛子源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

榛子源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于检测样品中榛子源性成分，基于探针法荧光定量PCR技术，具有高灵敏度和特异性，适用于科研领域的定性与定量分析。试剂盒包含预混缓冲液、酶混合液、引物-探针干粉及阳性对照，操作便捷，兼容常规DNA提取方法。

包装规格

| 成分 | 规格 |

| 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |

| 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| PCR阳性对照（10^7拷贝/μL）| 50 μL |

操作流程

1. 标准曲线制备（10^1–10^6拷贝/μL）

注意事项：稀释需在独立区域进行，避免交叉污染。

步骤：

标记6管，分别加入45 μL稀释液。

依次梯度稀释阳性对照（5 μL至下一管），震荡混匀，冰上保存。

2. 样品DNA制备

建议设置N+2个样本（含阴/阳性对照），使用兼容的DNA提取方法。

3. qPCR反应体系（20 μL）

| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |

| qPCR缓冲液 | 10 μL | 10 μL | 10 μL |

| 酶混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 引物-探针混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 待测DNA模板 | 5 μL | — | — |

| 标准曲线稀释液 | — | — | 5 μL |

| 超纯水 | — | 5 μL | — |

4. 扩增程序

逆转录：50℃ 30 min（如需）。

预变性：94℃ 10 min。

40循环：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号）。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样品浓度。

定性检测：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值需复测。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、加样），避免污染。

使用带芯枪头，反应液避光保存。

实验后消毒台面（10%次氯酸或75%酒精）。

所有组分需-20℃保存，有效期12个月。

局限性

结果受样本采集、提取方法及运输条件影响。

基因突变或试剂保存不当可能导致假阴性/阳性。

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