猫杯状病毒前病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

猫杯状病毒前病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒用于检测猫杯状病毒前病毒（FCV）核酸，适用于科研领域对FCV感染的辅助诊断。检测结果仅供研究参考，不可用于临床诊断或治疗。

检验原理

采用TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，针对FCV基因保守区域设计特异性引物及探针。在反应体系中，若存在FCV核酸模板，PCR扩增释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度，实现定性和定量分析。

试剂组成

| 成分 | 规格 |

| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL |

| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100 μL |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| FCV探针法qRT-PCR引物混合液 | 100 μL |

| FCV qRT-PCR探针 | 50 μL |

| FCV阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL |

| 说明书 | 1份 |

储存条件及有效期

运输条件：低温运输（-20℃）。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

自备试剂与耗材

无RNA酶的1.5 mL离心管、0.2 mL PCR反应管、滤芯吸头（10/200/1000 μL）。

离心机、振荡混合器、移液器。

病毒RNA提取试剂盒（推荐柱式提取法）。

样品要求

样本类型：全血、血清、粪便、呼吸道分泌物、拭子等。

保存与运输：

短期保存：-20℃；长期保存：-70℃（≤6个月）。

运输需使用2~8℃冰袋，避免反复冻融。

使用方法

1. 标准曲线制备（10²–10⁷拷贝/μL梯度稀释）

标记6管，依次稀释阳性对照至6个浓度梯度，冰上保存备用。

2. RNA提取

使用商品化RNA提取试剂盒，设置阴性/阳性对照（N+2样本数）。

3. qRT-PCR反应（20 μL体系）

| 成分 | 样品管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |

| PCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |

| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |

| 探针 | 1 | 1 | 1 |

| 引物混合液 | 2 | 2 | 2 |

| RNA模板 | 5 | - | - |

| 标准品 | - | - | 5 |

| 超纯水 | - | 5 | - |

4. 反应程序

逆转录：50℃ 30 min

预变性：94℃ 10 min

PCR循环（40次）：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM通道信号）

数据分析

定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性分析：阴性对照Ct值≥40，阳性对照Ct值≤35。

注意事项

操作需分区（样本制备区、试剂配制区、扩增区），避免交叉污染。

阳性对照为人工合成DNA片段，无传染性。

不同批号试剂不可混用。

公司正在出售的产品