半边莲探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品特点

高特异性：引物与探针针对半边莲DNA保守区域设计，无交叉反应。

灵敏度高：可检测低至10²拷贝/μL的模板，线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

即开即用：预混含Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液及荧光探针，仅需添加模板。

质量控制：提供无传染性阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）及阴性对照，区分假阴性结果。

兼容性：适配多数DNA提取试剂盒，裂解液可直接作为PCR模板。

试剂盒组成

| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |

| 2×Probe qPCR MasterMix | 1 mL（红盖） | -20℃ |

| 半边莲引物探针混合液 | 100 μL（白盖） | -20℃ |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | -20℃ |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | 室温 |

| 核酸释放剂（试用装） | 1 mL（绿盖） | 4℃ |

实验步骤

1. 标准曲线制备

梯度稀释阳性对照至10⁷~10²拷贝/μL（6个浓度点），冰上操作避免降解。

2. 样本DNA制备

建议设置N+2个样本（含阴性/阳性对照），纯化后调整浓度至20~100 ng/μL。

3. qPCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×Probe MasterMix | 10 |

| 引物探针混合液 | 0.8 |

| 模板DNA | 2 |

| 超纯水 | 7.2 |

程序设置：

预变性：95℃ 5 min

循环：95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec（40循环，采集荧光信号）

4. 数据分析

定量：以Ct值绘制标准曲线，计算样本拷贝数。

定性：Ct≤35为阳性，Ct≥40为阴性；35<Ct<40需复测。

注意事项

保存与运输：-20℃避光保存，避免反复冻融；低温运输。

污染控制：分区操作（试剂准备/样本处理/PCR扩增），使用带滤芯枪头。

有效期：12个月（生产日期见标签）。

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