开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，用于食品或其他材料中开心果源性成分的定性与定量检测。适用于食品安全监管、过敏原筛查及科研领域，不适用于临床诊断。

检验原理

探针法原理：

探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。

PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，信号强度与靶序列含量成正比。

定量分析：通过标准曲线（10²~10⁷拷贝/μL）计算待测样本中开心果源性成分的拷贝数。

产品特点

高灵敏度：引物及探针针对开心果保守基因区域设计，检测限低至10²拷贝/μL。

高特异性：无与其他植物或病原体的交叉反应。

即开即用：预混缓冲液、酶及引物探针混合物，仅需提供DNA模板。

双对照系统：含阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）和阴性质控品，确保结果可靠性。

试剂组成

| 成分 | 规格 |

| qPCR缓冲液 | 500μL |

| 酶混合液 | 100μL |

| 引物混合液 | 100μL |

| TaqMan探针 | 50μL |

| 阳性质控品 | 50μL（1×10⁸拷贝/μL） |

| 模板稀释液 | 1mL |

| 说明书 | 1份 |

储存与运输

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容ABI 7500、Bio-Rad CFX96、LightCycler 480等主流荧光定量PCR仪。

自备耗材

无核酸酶离心管（0.2mL/1.5mL）、滤芯吸头（10/200/1000μL）。

核酸提取试剂（推荐柱式提取法）。

操作步骤

标准曲线制备（独立区域操作）：

将阳性质控品10倍梯度稀释（10⁷~10²拷贝/μL），分装至标记管中。

样本DNA提取：

使用商品化试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10ng/μL。

PCR反应体系配制（20μL/反应）：

| 组分 | 体积 |

| qPCR缓冲液 | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL |

| 引物混合液 | 2μL |

| TaqMan探针 | 1μL |

| DNA模板 | 5μL |

扩增程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 逆转录 | 50℃ | 30 min |

| 预变性 | 94℃ | 10 min |

| 扩增（40循环） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |

结果分析

定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤35为有效。

注意事项

分区操作（试剂配制、样本处理、扩增区），避免污染。

阳性质控品需最后加入，防止气溶胶污染。

本产品仅限科研使用。

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