胡桃源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

胡桃源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于检测胡桃源性成分，适用于科研用途（不可用于临床）。试剂盒包含50次20μL体系的反应组分，可进行高特异性、高灵敏度的核酸定量或定性分析。

规格及组分

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL |

| 试剂二 | 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | 胡桃源性成分引物混合液 | 100μL |

| 试剂五 | 胡桃源性成分qRT-PCR探针 | 50μL |

| 试剂六 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL |

| - | 说明书 | 1份 |

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输条件：低温运输，避免反复冻融。

自备试剂与仪器

样品RNA提取试剂（兼容柱式病毒RNA提取试剂盒）。

荧光定量PCR仪、离心机、冰盒、移液器（20μL-1000μL）及带芯枪头。

实验操作流程

1. 标准曲线制备（6个梯度稀释）

标记离心管（7-2号），每管加45μL模板稀释液。

7号管加入5μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀得1×10⁷拷贝/μL标准品，依次稀释至10²拷贝/μL（2号管）。

2. 样品RNA制备

建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），使用超纯水作为阴性对照。

提取RNA后需验证纯度（A260/A280比值1.8-2.0）。

3. PCR反应体系（20μL/管）

| 成分 | 样品管（N+2） | 阴性对照 | 标准曲线管 |

| qRT-PCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 探针 | 1μL | 1μL | 1μL |

| 引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 样品RNA/标准品/水 | 5μL | 5μL水 | 5μL标准品 |

4. PCR程序

逆转录：50℃ 30分钟

预变性：94℃ 10分钟

40循环：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM信号）

数据分析

定量检测：以标准品log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制曲线，计算样本浓度。

定性检测：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤35方为有效。

注意事项

操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。

移液误差需≤2%，建议使用校准移液器。

试剂使用前需平衡至室温，避光操作。

推荐双孔复检以确保数据准确性。

免责声明

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。实验需遵守相关生物安全规范。

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