石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒专用于石斑鱼源性成分的探针法荧光定量PCR检测，适用于科研领域。采用特异性引物和探针，针对石斑鱼DNA高度保守区设计，确保高灵敏度和特异性，可进行定性和定量分析。

产品规格

型号：50T（50次反应，20μL体系/次）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温运输（泡沫箱加冰密封）。

产品特点

即开即用：仅需提供样品DNA模板。

高灵敏度：引物和探针经优化，检测限低至10^1拷贝/μL。

高特异性：避免与其他微生物或病毒DNA交叉反应。

双功能检测：支持定性和定量分析，定量线性范围达5个数量级。

内置对照：含阳性对照（无传染性DNA片段），便于排除假阴性。

实验流程

1. 标准曲线制备（以10^1–10^6拷贝/μL为例）

标记离心管（1–6号），依次加入45μL稀释液。

在6号管加入5μL阳性对照（1×10^7拷贝/μL），震荡混匀后梯度稀释至1号管。

2. 样品DNA提取

建议设置阴性对照（NC）和制备阳性对照（PC）。

使用兼容的DNA提取试剂盒或柱式纯化法。

3. PCR反应体系（20μL）

按比例加入预混液、引物探针、模板DNA，阴性对照以水替代模板。

阳性对照需最后加样，避免污染。

4. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40–45循环）。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。

定性检测：

阳性：Ct≤35，扩增曲线典型；

阴性：Ct≥40；

可疑（35<Ct<40）：需重复检测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行。

防污染措施：使用带滤芯枪头，定期消毒工作台。

试剂保存：避光解冻，避免反复冻融。

适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断。

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