鲑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

鲑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

用于检测鲍鱼等样本中鲑鱼源性成分的DNA，适用于科研实验。

检测原理

本试剂盒基于双通道荧光定量PCR技术，通过特异性探针与引物对鲑鱼源性DNA靶序列进行扩增和定量检测。采用标准品同步扩增法，将参照基因（如管家基因RPPH1）与目的基因（如鲑鱼特异性序列）克隆至同一质粒载体（如pMD18-T），构建标准曲线，通过计算拷贝数比值实现相对定量，提高检测可靠性。

产品特点

高特异性：引物基于鲑鱼保守序列设计，无交叉反应。

高灵敏度：最低检测限达几百拷贝/反应。

操作简便：一管式反应体系，减少污染风险。

对照齐全：含阳性对照，有效区分假阴性结果。

即开即用：用户仅需提供待测样本DNA即可开展实验。

操作步骤

（一）标准品稀释（以10^2-10^7拷贝/μL梯度为例）

标记7管为1-7号，1号管加90μL稀释液，其余各加45μL。

取10μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入1号管，混匀后依次10倍稀释至6号管（7号管为阴性对照）。

稀释需在独立区域进行，使用无菌耗材避免污染。

（二）PCR扩增

将待测样本与标准品同步加入反应体系。

按以下程序运行荧光定量PCR仪：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环）

通过标准曲线计算目的基因与参照基因拷贝数比值，获得定量结果。

注意事项

实验需在符合生物安全标准的实验室进行。

避免试剂反复冻融，开封后尽快使用。

阳性对照需与其他组分分区域操作，防止污染。

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