哺乳动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

哺乳动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用探针法实时荧光定量PCR技术，专为检测食品及其他材料中哺乳动物源性成分而设计。通过针对哺乳动物高度保守基因序列的特异性引物和探物探针，实现对样品中哺乳动物DNA成分的快速、灵敏检测，适用于食品真伪鉴定和安全监管。

预期用途：科研用，检测食品及其他材料中哺乳动物源性成分

技术原理

本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术：

特异性引物设计：针对哺乳动物源性成分高度保守区设计引物，确保检测特异性

荧光探针系统：探针5'端标记报告荧光基团，3'端标记淬灭基团，PCR扩增时Taq酶水解探针释放荧光信号

实时监测：通过qPCR仪实时监测荧光信号变化，实现定量分析

产品组成

2×Probe qPCR Mix

哺乳动物源性成分引物探针混合液

阳性对照（1×10⁸ copies/μL）

阴性对照（无核酸酶水）

RNase-Free Water

操作流程

样本处理

DNA提取：使用兼容的核酸提取试剂盒提取样品DNA

质量控制：建议测定DNA浓度和纯度（A260/A280比值1.8-2.0）

标准曲线制备（定量检测时）

标记6支离心管（7-2号）

7号管加90μL无核酸酶水，其余各加45μL

取10μL阳性对照加入7号管，混匀后取5μL转移至6号管，依次稀释至2号管

最终获得10⁷-10² copies/μL的6个梯度标准品

PCR反应体系配制（20μL体系）

| 组分 | 体积(μL) |

| 2×Probe qPCR Mix | 10 |

| 引物探针混合液 | 2 |

| 模板DNA | 2 |

| RNase-Free Water | 6 |

扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 30sec | 40 |

| 荧光采集 | 60℃ | - | - |

注：不同仪器可能需调整参数，请参照仪器说明书

结果分析

定量分析

以阳性对照浓度的log值为横坐标，Ct值为纵坐标绘制标准曲线

通过样品Ct值计算DNA浓度

定性分析

阳性对照：Ct值≤30，典型S型扩增曲线

阴性对照：Ct值≥38或无Ct值

样品判定：

Ct值≤35：阳性

Ct值≥38：阴性

35<Ct值<38：需复测，复测Ct值<40且有扩增曲线判为阳性

性能参数

检测限：≤10 copies/反应

线性范围：10²-10⁷ copies/μL（R²≥0.99）

特异性：不与常见非哺乳动物DNA发生交叉反应

重复性：Ct值变异系数<5%

注意事项

实验分区操作：样本处理、试剂配制、扩增分析应在独立区域进行

使用带滤芯吸头，避免气溶胶污染

所有组分使用前需完全溶解并混匀，短暂离心后使用

反应液避光保存，避免反复冻融（≤3次）

实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒工作区

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断

运输与储存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）

储存条件：-20℃避光保存

有效期：12个月

公司正在出售的产品